[发明专利]治疗性蛋白药物物质的整合连续制造

权利要求书

1.一种用于制造治疗性蛋白药物物质的整合且连续的方法，所述方法包括：

(i)提供含有重组治疗性蛋白的基本上无细胞的液体培养基，其中将所述液体培养基进料入第一多重柱层析系统(MCCS1)；

(ii)使用MCCS1捕获液体培养基中的所述重组治疗性蛋白，其中将含有所述重组治疗性蛋白的MCCS1的洗出液连续进料入第二多重柱层析系统(MCCS2)；和

(iii)使用MCCS2纯化和精炼所述重组治疗性蛋白，其中来自MCCS2的洗出液是治疗性蛋白药物物质；且

其中所述方法是整合的且从所述液体培养基连续地运行至MCCS2的洗出液，所述洗出液为治疗性蛋白药物物质。

2.权利要求1的方法，其中所述液体培养基选自下组：由含有分泌重组治疗性蛋白的哺乳动物细胞的培养物的灌注生物反应器移出的液体培养基、由含有分泌重组治疗性蛋白的哺乳动物细胞的培养物的补料分批生物反应器移出的液体培养基，和来自分泌重组治疗性蛋白的细菌或酵母细胞的培养物的经澄清的液体培养基。

3.权利要求1的方法，其中所述MCCS1和/或MCCS2实施至少两个不同单元操作。

4.权利要求1的方法，其中MCCS1或MCCS2或两者的使用涉及柱切换。

5.权利要求3的方法，其中所述MCCS1实施捕获重组治疗性蛋白和灭活病毒的单元操作。

6.权利要求3的方法，其中所述MCCS2实施纯化和精炼重组治疗性蛋白的单元操作。

7.权利要求1的方法，其中MCCS1和/或MCCS2采用至少两个层析柱。

8.权利要求1的方法，其中MCCS1和/或MCCS2采用至少两个层析膜。

9.权利要求1的方法，其中MCCS1和/或MCCS2采用至少一个层析柱以及至少一个层析膜。

10.权利要求2的方法，其中所述液体培养基为由含有分泌重组治疗性蛋白的哺乳动物细胞的培养物的灌注生物反应器移出的液体培养基。

11.权利要求1的方法，其中所述MCCS1为第一周期性对流层析系统(PCCS1)。

12.权利要求11的方法，其中所述PCCS1包括四柱PCCS。

13.权利要求12的方法，其中所述四柱PCCS的四个柱中的三个实施从液体培养基捕获重组治疗性蛋白的单元操作。

14.权利要求13的方法，其中使用亲和层析、阳离子交换层析、阴离子交换层析或分子筛层析实施捕获。

15.权利要求14的方法，其中所述亲和层析使用选自下组的捕获机制实施：蛋白A-结合捕获机制、基质-结合捕获机制、抗体-或抗体片段-结合捕获机制、适体-结合捕获机制和辅因子-结合捕获机制。

16.权利要求15的方法，其中所述亲和层析使用蛋白-A结合捕获机制实施，且所述重组治疗性蛋白为抗体或抗体片段。

17.权利要求13的方法，其中将来自四柱PCCS的四个柱中的三个的含有重组治疗性蛋白的洗出液进料至四柱PCCS的第四个柱中。

18.权利要求17的方法，其中四柱PCCS的第四个柱通过将含有重组治疗性蛋白的洗出液维持在用于病毒灭活的低pH来实施灭活病毒的单元操作。

19.权利要求18的方法，其中四柱PCCS的第四个柱将含有重组治疗性蛋白的洗出液维持在用于病毒灭活的低pH约10分钟至约1.5小时的时段。

20.权利要求18的方法，其中所述MCCS2为第二周期性对流(PCCS2)层析系统。

21.权利要求20的方法，其进一步包括使用在线缓冲液调整贮液器在将洗出液由四柱PCCS的第四个柱进料至PCCS2前调整来自四柱PCCS的第四个柱的洗出液的pH。

22.权利要求21的方法，其中所述PCCS2层析系统包括三个层析柱和一个层析膜。

23.权利要求22的方法，其中所述PCCS2中的三个层析柱通过阳离子或阴离子交换层析实施纯化来自PCCS1的洗出液的重组治疗性蛋白的单元操作。