[发明专利]用于免疫印迹的微流体装置

说明书

本申请要求在2013年3月12日提交的美国临时专利申请61/777,682的优先权，所述申请以整体引用的方式并入本文。

领域

本发明提供用于在免疫印迹应用中使用的微流体装置、系统和方法。具体而言，本文提供的装置和方法具有传统蛋白质印迹的优点，同时具有增加的生产量和多重能力以及减少的时间、样品和试剂需求。

背景

传统蛋白质印迹分析(或免疫印迹)用于检测细胞、组织、器官、体液等中的特定的蛋白质。该技术是生物化学和分子生物学的支柱。样品中的蛋白质通过凝胶电泳(例如，SDS-PAGE)分离并且然后从凝胶转移到膜(例如，硝化纤维素或PVDF)。然后将膜用对靶蛋白特异的抗体染色。虽然可靠地产生有用的信息，但所述技术：耗时、需要专门技术、试剂密集型、有限的生产量并且不太适用于多重性。需要的是提供传统蛋白质印迹的优点，同时具有增加的生产量、多重能力和减少的试剂使用的技术。

发明概述

本发明提供用于在免疫印迹应用中使用的微流体装置、系统和方法。具体而言，本文提供的装置和方法具有传统蛋白质印迹的优点，同时具有增加的生产量和多重能力以及减少的时间、样品和试剂需求。

在一些实施方案中，本发明提供一种微流体免疫印迹装置，其包括平的膜接触表面和多个非连接的平行微流体通道，其中所述微流体通道的长度对膜接触表面是开放的。在一些实施方案中，微流体通道在空间上被分成两个或更多个通道组。在一些实施方案中，两个或更多个通道组的每个包括2-20微流体通道。在一些实施方案中，分离微流体通道与通道组的距离小于通道组之间的距离。在一些实施方案中，微流体通道(例如，微流体通道的每个)包括在微流体通道的一端的储蓄池。在一些实施方案中，微流体通道(例如，微流体通道的每个)包括在微流体通道的两端的储蓄池。在一些实施方案中，每个微流体通道是50-300μm宽。在一些实施方案中，每个微流体通道是100-200μm宽。在一些实施方案中，每个微流体通道是140-160μm宽。在一些实施方案中，每个微流体通道是30-200μm深。在一些实施方案中，每个微流体通道是50-150μm深。在一些实施方案中，每个微流体通道是90-110μm深。在一些实施方案中，微流体通道的宽度与深度的比小于10:1(例如，<9:1、<8:1、<7:1、<6:1、<5:1、<4:1、<3:1、<2:1)。在一些实施方案中，微流体通道的宽度与深度的比在3:1至1:3之间(例如，2:1至1:2)。在一些实施方案中，微流体通道的宽度与深度的比是9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1.5:1、1:1、1:1.5、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8或1:9。在一些实施方案中，微流体通道的宽度与深度的比在3:1至1:3之间(例如，2:1至1:2)。在一些实施方案中，所述装置包括聚二甲基硅氧烷(PDMS)。在一些实施方案中，所述装置基本由聚二甲基硅氧烷(PDMS)组成。在一些实施方案中，本发明提供免疫印迹的方法，所述方法包括使用本发明的装置将抗体溶液施用于膜。

在一些实施方案中，本发明提供包括本发明的装置和膜的系统(例如，分析)。在一些实施方案中，激活溶液被定位或放置在所述的装置和所述的膜之间。在一些实施方案中，所述激活溶液包含聚山梨醇酯-20(Tween-20)和BSA。在一些实施方案中，所述激活溶液包含0.01-0.5％的Tween-20和0.01-0.5％的BSA。在一些实施方案中，所述激活溶液包含0.05-0.15％的Tween-20和0.05-0.15％的BSA。在一些实施方案中，所述激活溶液包含0.1％的Tween-20和0.1％的BSA。在一些实施方案中，所述膜包含膜硝化纤维素或聚偏二氟乙烯(PVDF)。在一些实施方案中，所述膜包括在膜上或在膜内的肽、多肽或蛋白质。在一些实施方案中，系统还包括在微流体通道内的一种或多种含抗体溶液。在一些实施方案中，通道组的每个微流体通道包括不同的含抗体溶液。在一些实施方案中，每个通道组包括含抗体溶液的相同的组合。在一些实施方案中，每个微流体通道包括不同的含抗体溶液。在一些实施方案中，本发明提供免疫印迹的方法，所述方法包括使用本发明的系统将抗体溶液施用于膜。