[发明专利]结合到RSV G蛋白的人类抗体

说明书

本发明涉及结合到RSV的G蛋白并且能够中和RSV A和B亚型的分离的抗体和抗原结合片段，和其在诊断、预防、和/或治疗RSV感染中的用途。

发明领域

本发明涉及医学。本发明尤其涉及特异性结合到呼吸道合胞体病毒(RSV)的附着糖蛋白(G蛋白)并且中和RSV的抗体和抗原结合片段。本发明还涉及使用抗RSV抗体的诊断、预防以及治疗方法。

发明背景

人类呼吸道合胞体病毒(RSV)是副粘病毒科(Paramyxoviridae)的一种负义单链RNA病毒，该科还包括常见呼吸道病毒，如导致麻疹和腮腺炎的呼吸道病毒。存在两种原始RSV亚型：亚型A和亚型B。RSV在上呼吸道中复制并且然后蔓延到下气道，导致细支气管炎或肺炎。该病毒引起炎症、气道水肿、粘液产生增加以及呼吸上皮破裂。

估计全世界有6400万例呼吸道疾病和160,000例死亡可归因于RSV诱发的疾病。严重RSV感染最通常出现在儿童和婴儿中、尤其早产儿中。潜在健康问题(如慢性肺病或先天性心脏病)可能会显著增加重病的风险。RSV感染还可能会在年老者、患有慢性肺病的个体以及免疫功能不全的成人(如骨髓移植接受者)中引起重病。

已经研究若干用以预防和治疗RSV感染的方法。从供体分离的静脉注射免疫球蛋白(RSV-IGIV；)和单克隆抗体帕利珠单抗()已经得到批准用于在高风险早产儿中进行RSV预防。然而，用于RSV的疫苗或可商购治疗仍不可获得。仅利巴韦林(一种RNA抑制剂)得到批准用于治疗RSV感染。为了有效用于治疗RSV感染，高剂量、重复给药和/或大量的抗体产品(如帕利珠单抗)因低有效性而是所需的。

RSV具有两种主要表面糖蛋白，F和G。F蛋白介导融合，使得病毒进入到细胞的细胞质中并且促进体外合胞体的形成。F蛋白序列在RSV株之中是充分(约90％)保守的(约翰逊(Johnson)和柯林斯(Collins)，《普通病毒学杂志》(J Gen Virol)，(1988)69:2623-2628)。唯一市售的单克隆抗体帕利珠单抗针对RSV的F蛋白。

RSV的G蛋白是一种严重糖基化并且充当附着蛋白的表面蛋白。与F蛋白对比，G蛋白在病毒株中除中央保守域(CCD)外相当可变，该中央保守域包含RSV A2株的G蛋白的氨基酸残基153-184或其他病毒株中的相对应的氨基酸残基。中央保守域和相邻区(残基145-193)以刚性和重O-糖基化粘蛋白样区为边界。中央保守域的N末端那一半含有一个在多于700种病毒株之中保守的小区。C末端那一半含有4个以1-4、2-3布局连接的保守半胱氨酸并且折叠为一个胱氨酸套索。

尽管使用针对G蛋白的抗体进行的被动免疫一般由于在病毒株中缺乏序列保守性而被视为不切实际的，但中和结合到RSV G蛋白的单克隆抗体是已知的。安德森L.J.(Anderson,L.J.)等人(《病毒学杂志》(J.Virol.)(1988)62:4232-4238)描述了F和G鼠类单克隆抗体混合物的中和能力，这些抗体之一结合到RSV G蛋白(即131-2G)。这种抗体的抗原位点后来由萨伦德(Sullender)定义(《病毒学》(Virol.)(1995)209:70-79)。发现这种抗体结合代表RSV的主要病毒株的RSV组A和B。另外，WO 2009/055711披露了与RSV A2的G蛋白内的保守基元具有免疫反应性并且针对RSV A和B亚型具有中和活性的抗体，如3D3和3G12。这些抗体已经显示识别中央保守域中的线性表位，但尚未在优选动物模型(即棉花大鼠)中进行测试用于评估RSV抗体和疫苗。

鉴于特别是在幼儿和年老者中由RSV引起的呼吸道疾病的严重程度，持续需要用以预防和治疗RSV感染的有效手段。

发明概述

本发明提供了特异性结合到RSV G蛋白并且能够中和RSV的分离的抗体和其抗原结合片段。这些抗体和抗原结合片段优选地能够特异性结合到并且中和亚型A和B的RSV。优选地，这些抗体是人类抗体。这些抗体结合到该RSV G蛋白的中央保守未糖基化区(也称为中央保守域，CCD)中的表位。