[发明专利]细胞外核酸的稳定化和分离

权利要求书

1.一种方法，所述方法通过将含有细胞的生物样品与丁酰胺相接触，使所述含有细胞的生物样品中包含的细胞外核酸群体稳定，其中减少或防止了所述生物样品中包含的细胞外核酸群体被源自于稳定化的样品中包含的细胞的细胞内核酸污染。

2.权利要求1的方法，其中还将所述含有细胞的生物样品与下述a)和/或b)相接触：

a)至少一种半胱天冬酶抑制剂；和/或

b)至少一种式1的化合物

其中R1是氢或烷基，R2和R3相同或不同，并选自氢和以直链或支链方式排列的碳链长度为1-20个原子的烃基，并且R4是氧、硫或硒。

3.权利要求2的方法，其中所述式1的化合物具有一种或多种下列特征：

a)R1是C1-C5烷基；

b)R1是C1-C2烷基；

c)R4是氧；

d)所述式1的化合物是N,N-二烷基丙酰胺；和/或

e)所述式1的化合物是N,N-二甲基丙酰胺。

4.权利要求1的方法，其中在已将所述含有细胞的生物样品与丁酰胺并任选地与用于稳定化的其他添加剂相接触后，所得到的混合物包含浓度范围为0.25％(w/v)至15％(w/v)的丁酰胺。

5.权利要求4的方法，其中所得到的混合物包含浓度范围为0.75％(w/v)至2％(w/v)的丁酰胺。

6.权利要求2的方法，其中为了稳定化，将所述含有细胞的样品与稳定化组合物相接触，所述稳定化组合物包含：

a)丁酰胺；

b)至少一种泛半胱天冬酶抑制剂；

c)任选地至少一种式1的化合物；以及

d)任选地抗凝剂。

7.权利要求6的方法，其中为了稳定化，将所述含有细胞的样品与稳定化组合物相接触，所述稳定化组合物包含：

a)丁酰胺；

b)至少一种泛半胱天冬酶抑制剂；

c)任选地N,N-二烷基-羧酸酰胺；以及

d)任选地螯合剂。

8.权利要求2的方法，用于使包含在血样中的细胞外核酸群体稳定化，所述方法包括将所述血样与丁酰胺、至少一种半胱天冬酶抑制剂、至少一种式1的化合物和抗凝剂相接触，其中从所述血样中包含的细胞释放到所述血样的无细胞部分中的基因组DNA减少。

9.权利要求1至8任一项的方法，其中还将所述含有细胞的生物样品与至少一种聚氧乙烯聚合物相接触。

10.权利要求9的方法，其中所述聚氧乙烯聚合物具有一种或多种下列特征：

a)它是聚乙二醇；和/或

b)它是分子量为至少1500的高分子量聚氧乙烯聚合物。

11.权利要求10的方法，其中所述高分子量聚氧乙烯聚合物的分子量在2000至40000的范围内。

12.权利要求9的方法，其中将分子量不同的至少两种聚氧乙烯聚合物用于稳定化，其中所述分子量的差异为至少100。

13.权利要求10的方法，其中还将所述含有细胞的生物样品与分子量为1000或更低的低分子量聚氧乙烯相接触。

14.权利要求13的方法，其中所述低分子量聚氧乙烯的分子量在100至800的范围内。

15.权利要求1至8任一项的方法，其中所述稳定化(i)不涉及其浓度会诱导或促进有核细胞裂解的添加剂的使用，(ii)其中所述稳定化不涉及诱导蛋白质-核酸和/或蛋白质-蛋白质交联的交联剂的使用，和/或(iii)其中所述稳定化不涉及有毒试剂的使用。