[发明专利]多重核酸合成的组合物和方法

权利要求书

1.一种生成有预定序列的至少一种靶核酸的方法，所述方法包括：

a)提供具有第一多个突出端的多个双链锚定寡核苷酸，其中所述锚定寡核苷酸连接至支持物；

b)提供具有第二多个突出端的多个双链构建寡核苷酸，其中所述第二多个突出端设计为与所述第一多个突出端互补；

c)杂交并连接所述锚定寡核苷酸和所述构建寡核苷酸；和

d)任选重复步骤b)-c)，从而产生所述至少一种靶核酸。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述第一多个突出端设计为彼此之间相对相互正交。

3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述第二多个突出端设计为彼此之间相对相互正交。

4.如权利要求3所述的方法，其中所述支持物是固体。

5.如权利要求4所述的方法，其中所述支持物是珠。

6.如权利要求3所述的方法，其中所述支持物是茎环多核苷酸。

7.如权利要求3所述的方法，其中所述锚定寡核苷酸固定于相同支持物。

8.如权利要求3所述的方法，其中各所述锚定寡核苷酸固定于不同支持物。

9.如权利要求1中任一项所述的方法，其中步骤a)-d)在单一反应体积中进行。

10.一种生成至少一种有预定序列的靶核酸的方法，所述方法包括：

a)连接具有第一多个突出端的第一多个双链寡核苷酸和具有第二多个突出端的第二多个双链寡核苷酸，其中所述第一多个突出端设计为与所述第二多个突出端互补，从而生成第一组多核酸，其中所述第一多个突出端设计为彼此相对相互正交，并且其中第二多个突出端设计为彼此相对相互正交；

b)连接具有第三多个突出端的第三多个双链寡核苷酸和具有第四多个突出端的第四多个双链寡核苷酸，其中所述第三多个突出端设计为与所述第四多个突出端互补，从而生成第二组多核酸，其中所述第三多个突出端设计为彼此相对相互正交，并且其中第四多个突出端设计为彼此相对相互正交；和

c)连接所述第一组多核酸和所述第二组多核酸，其中所述第一组多核酸和第二组多核酸设计为具有互补突出端，从而形成至少一种靶核酸。

11.如权利要求10所述的方法，还包括任选地重复步骤a)-c)。

12.一种生成有预定序列的至少一种靶核酸的方法，所述方法包括：

a)提供具有相同突出端的多个双链通用锚定寡核苷酸，其中所述通用锚定寡核苷酸固定在支持物上，并且其中所述支持物选自珠或茎环多核苷酸；

b)提供具有两个突出端的第一多个双链构建寡核苷酸，其中两个突出端之一与所述通用锚定寡核苷酸的突出端互补并且另一突出端与所述通用锚定寡核苷酸的突出端不互补；

c)杂交并连接所述双链通用锚定寡核苷酸和所述双链构建寡核苷酸；

d)提供具有突出端的第二多个双链构建寡核苷酸，该突出端与所述第一多个双链构建寡核苷酸的与所述通用锚定寡核苷酸的突出端不互补的突出端互补；

e)杂交并连接所述第一多个双链构建寡核苷酸和所述第二多个双链构建寡核苷酸；和

f)任选重复步骤d)-e)，从而产生所述至少一种靶核酸。

13.如权利要求12所述的方法，其中所述第一多个双链构建寡核苷酸的其他突出端设计为彼此之间相对相互正交。

14.如权利要求12或13所述的方法，其中所述第二多个双链构建寡核苷酸的突出端设计为彼此之间相对相互正交。

15.如权利要求12或13所述的方法，其中步骤a)-d)在单一反应体积中进行。