[发明专利]用于核酸提取的组合物和方法

权利要求书

1.从细胞来源材料提取核酸的方法，所述方法包括：

a) 提供

i)细胞来源材料，其中所述细胞来源材料选自活细胞来源材料和固定细胞来源材料，和

ii)pH为10或更高并且包含选自2,2'-(亚乙基二氧基)二(乙胺)(EDBE)、1,3-二氨基丙烷和3-氨基-1-丙醇的一种或多种伯胺单体的含水提取溶液，其中所述含水提取溶液是无蛋白酶的；

b) 使所述细胞来源材料与所述提取溶液接触，导致细胞材料的裂解和核酸的提取；和

c) 使所述核酸结合至所述提取溶液中的固体基质。

2.权利要求1的方法，其中所述含水提取溶液进一步包含离液剂。

3.权利要求2的方法，其中所述离液剂选自脲、硫氰酸胍(GITC)、乙醇和丁醇中的一种或多种。

4.权利要求1的方法，其中所述含水提取溶液进一步包含去污剂和醇中的一种或多种。

5.权利要求4的方法，其中所述去污剂选自Tween^TM、聚山梨醇酯、脱氧胆酸盐、脱氧胆酸钠和十二烷基硫酸钠(SDS)、NP-40和Triton^TM X-100中的一种或多种。

6.权利要求5的方法，其中所述去污剂的浓度为8％至15％。

7.权利要求6的方法，其中所述醇选自乙醇和丁醇中的一种或多种。

8.权利要求7的方法，其中所述醇的浓度为15％至25％。

9.权利要求1的方法，其中所述含水提取溶液中的伯胺单体的浓度为30 %至50 %。

10.权利要求2的方法，其中所述含水提取溶液中的离液剂的浓度为4M至5M。

11.权利要求1的方法，其中所述活细胞来源材料包含单细胞的悬浮液。

12.权利要求11的方法，其中所述细胞的悬浮液包含细菌。

13.权利要求12的方法，其中所述细菌是分枝杆菌。

14.权利要求1的方法，其中所述细胞的悬浮液包含酵母。

15.权利要求1的方法，其中所述含水提取溶液是无酶的。

16.权利要求1的方法，其中所述含水提取溶液是无蛋白酶的。

17.权利要求1的方法，其中所述固定细胞来源材料包含福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)材料。

18.包含适于从细胞来源材料提取核酸的含水提取溶液的组合物，其中所述细胞来源材料选自活细胞来源材料和固定细胞来源材料，所述组合物包含选自2,2'-(亚乙基二氧基)二(乙胺)(EDBE)、1,3-二氨基丙烷和3-氨基-1-丙醇的一种或多种伯胺单体；一种或多种离液试剂；一种或多种去污剂；一种或多种有机溶剂，并且pH为10或更高，其中所述含水提取溶液是无蛋白酶的。

19.权利要求18的组合物，其中所述离液剂选自脲、硫氰酸胍(GITC)、乙醇和丁醇中的一种或多种。

20.权利要求18的组合物，其中所述去污剂选自Tween^TM、聚山梨醇酯、脱氧胆酸盐、脱氧胆酸钠和十二烷基硫酸钠(SDS)、NP-40和Triton^TM X-100中的一种或多种。