[发明专利]治疗恶性胸膜间皮瘤的基于microRNA的方法

说明书

本发明涉及对应于miR‑15/107家族的microRNA模拟物，和用于通过恢复对MPM肿瘤细胞中miR‑15/107家族的靶基因表达的调控，使用microRNA模拟物来治疗恶性胸膜间皮瘤(MPM)的方法。

相关申请的交叉引用

本申请根据35U.S.C.§120要求2013年3月13日提交的美国申请序列号13/801,010的权益，所述申请的内容全文以引用方式并入本文。

发明背景

技术领域

本发明一般涉及分子生物学和癌症领域。更确切来说，本发明涉及对应于miR-15/107家族的microRNA模拟物，以及通过恢复对MPM肿瘤细胞中miR-15/107家族的靶基因表达的调控，使用microRNA模拟物来治疗恶性胸膜间皮瘤(MPM)的相关方法。

背景技术

恶性胸膜间皮瘤几乎始终是致命癌症，对其可用的治疗极少。迫切地需要新型疗法，并且失调microRNA表达提供了新型治疗靶的来源。

microRNA由RNA聚合酶II(pol II)或RNA聚合酶III(pol III)转录。参见Qi等(2006)Cellular&Molecular Immunology,第3卷:411-19。所述RNA聚合酶II(pol II)或RNA聚合酶III(pol III)源自初始转录物，称为初级microRNA转录物(初级microRNA)，其一般长达数千个碱基。初级microRNA在细胞核中由RNA酶Drosha处理成约70个至约100个核苷酸的发夹形前体(前体microRNA)。转运至细胞质之后，发夹前体microRNA由Dicer进一步处理以产生双链成熟microRNA。然后，将成熟microRNA链掺入到RNA诱导的沉默复合物(RISC)中，其中所述成熟microRNA链通过碱基对互补性而与其靶mRNA缔合。在相对少见的其中microRNA碱基与mRNA靶完美配对的情况下，所述microRNA链促进mRNA降解。更常见地，microRNA与靶mRNA形成不完美异源双链，从而影响mRNA稳定性或抑制mRNA翻译。

多个研究已概括了mRNA基因在MPM中的表达，以便识别潜在靶，并且最近，起初为了诊断性目的，已使用来源于正常和肿瘤细胞系、MPM肿瘤和合并正常心包膜、或MPM和肺癌的样本，生成了microRNA表达谱。同样为了预后性目的，生成了所述表达谱，即，在不同类别的MPM肿瘤内。参见例如Busacca等,Am.J.Respir.Cell.Mol.Biol.42:312-19(2010)。然而，尚未在MPM肿瘤与正常胸膜组织之间进行广泛性比较。

另外，虽然较为容易在体外使用，但是在体内功效方面，microRNA模拟物通常效果不佳，原因在于两个问题：(1)活性差(包括低RISC结合和脱靶效应)，和(2)非有效递送(与稳定性以及对作用部位的特异性/选择性分布相关)。

如所提及，多个研究已概括了MPM中的基因表达。这是为了理解疾病过程以及识别潜在靶。这些研究已表征了代谢和细胞循环基因在MPM中的一般上调，以及细胞凋亡基因的额外变化，所述额外变化伴有与耐化学疗法性有关的改变的细胞凋亡响应。目前为止，这些研究尚有待于揭示MPM肿瘤所共有的对表型进行遗传控制的支配性机制(overarchingmechanism)。然而，由于认为microRNA是基因表达的全局调节剂，所以microRNA表达的下调表示对基因家族的上调的潜在解释(即，microRNA表达的损失导致靶基因上调)。

发明内容

本发明是部分基于对microRNA家族的识别，在MPM肿瘤样本中，与来自未受影响个体的正常胸膜组织相比较，所述microRNA家族被下调。具体来说，本发明人发现在MPM组织中，microRNA的miR-15/107家族的表达被显著下调。

因此，本发明的一个方面涉及可用于治疗MPM的双链microRNA模拟物。本发明的这种miRNA模拟物包含：