[发明专利]用于微生物捕集的方法和材料

说明书

本文提供捕集生物物质的材料复合物以及合成和使用这种由流体不溶性材料和受体组成的复合物的方法。流体不溶性材料在它的表面上具有反应性官能度，包括羟基、氨基、巯基或环氧基官能度材料。所述材料可为琼脂糖、砂、织物或其任何组合。所述受体选自由以下组成的组：单糖和多糖、肝素或其任何组合。也提供借此可控制释放捕集的生物物质的方法。

领域

本公开涉及控制流体的生物组成的流体不溶性材料复合物以及制造和使用所述复合物的方法。

背景

已良好创建用作蛋白质纯化的色谱吸附剂的亲和配体-基质缀合物。举例来说，已在专利文献中公开使用基于苯基的配体来纯化蛋白质，包括纯化所需单克隆抗体。在色谱介质中用于纯化甲型流感病毒的其它已知亲和配体是融合肽和凝集素。此外，已描述关于使配体与基质核心隔开的研究。

用于纯化甲型流感病毒的替代性方法包括例如尺寸排阻和离子交换色谱法。

概述

本公开提供制造和使用特异性捕集微生物、蛋白质和其它生物物质，并且自流体移除它们的流体不溶性材料复合物的方法。本公开也涉及在某些条件下可控制地释放捕集的生物物质的选项。

一些实施方案涉及通过混合含有生物物质的样品与材料复合物，以及使固定的生物物质自所述样品物理分离来固定所述生物物质的方法。生物物质是通过它吸附于材料复合物而被固定。固定的生物物质与样品的其余部分的物理分离可通过如例如依赖于重力或磁力的倾析和过滤的方法来实现。材料复合物可包括含有羟基、氨基、巯基或环氧基的流体不溶性的材料和至少一种结合于所述材料的受体。生物物质可包括例如以下中的任一个：细胞、组织、组织产物、血液、血液产物、蛋白质、疫苗、抗原、抗毒素、病毒、微生物、真菌、酵母、藻类和/或细菌。固定的生物物质可接着如通过洗脱而从材料复合物提取。在病毒的情况下，提取的生物物质可接着被包括在疫苗治疗剂中。在蛋白质的情况下，提取的生物物质可接着被包括在疫苗或治疗性治疗剂中。

一些实施方案涉及由流体不溶性材料和受体组成的材料复合物。材料可为琼脂糖、砂、织物或其任何组合。流体不溶性材料在它的表面上具有反应性官能度，包括羟基、氨基、巯基或环氧基官能度材料。受体选自由以下组成的组：单糖和多糖、肝素或其任何组合。在一些实施方案中，组合物可包括在材料与受体之间桥接的连接体。连接体共价结合于材料和受体。连接体可为直链或支链小分子或聚合物。

一些实施方案涉及制造组合物的方法，其包括使受体连接在含有羟基的材料、含有环氧基的材料和含有氨基的材料上。受体可为乳糖。材料可为砂、琼脂糖、聚(甲基丙烯酸缩水甘油酯)(PGMA)或PGMA-NH₂。

附图简述

附图已被包括在本文中以使本公开的本文所述特征、优势和目标将变得明晰，并且可被详细理解。这些附图形成说明书的一部分。然而，应注意附图说明适合实施方案，并且不应被视为限制本公开的范围。

图1说明三个不同实施方案；直接或通过连接体间接使流体不溶性材料核心与受体复合。

图2A和2B说明用于流体消毒的材料复合物。

图3说明在亲和色谱法中使用材料复合物来浓缩溶液中的微生物。

图4A、4B和4C说明使受体直接连接于材料的实例。

图5A、5B和5C说明通过连接体使受体连接于材料的实例。

图6说明当使用1,1’-羰基二咪唑时的一般性共价偶联途径。

图7说明对PBS缓冲液中重组血凝素与不溶性材料的结合的定量；定量是使用Bradford蛋白质测定，通过测量595nm波长下的吸光度来进行。

图8说明对甲型流感病毒连接于不溶性材料的定量。