[发明专利]用于设计流式细胞术中的面板的系统和方法

说明书

本发明的实施例涵盖确定用于流式细胞术的各种抗体‑染料缀合物的检出限的系统和方法。示例性的技术涉及对溢出引起的正态分布测量误差扩大运用线性叠加方法。

相关申请的交叉引用

本发明要求于2013年3月15日提交的美国临时专利申请No.61/791,492的优先权，该专利申请在此以引用方式并入。

背景技术

本发明的实施例整体涉及用于评估生物样品的细胞的系统和方法，具体地讲，涉及用于选择抗体-染料缀合物的组合供流式细胞术使用的技术。另外的实施例整体涉及用于分析多色流式细胞术中的阳性率的自动化系统和方法。

使用荧光流式细胞术执行细胞表面免疫分型已成为用于将含有多种不同类型细胞的细胞样品中的所关注细胞区分出来并对其进行计数的较为常规的工艺。通常情况下，使用所关注细胞外表面上抗原的特异性细胞表面探针(例如荧光素标记的单克隆抗体(MAB)或其他适当标记的配体)来有选择地标记此类细胞或有选择地将此类细胞“染色”，供后续检测分析。流式细胞仪用专门适用于激发荧光素标签的辐射通过逐一照射样品中的各个细胞来检测染色细胞。荧光素标签在被照射时发出荧光，而与这些标签相关的细胞将入射辐射以由被照射细胞的物理和光学特性决定的图案散射。流式细胞仪中的适当光检测器检测这些荧光和散射的辐射，且其相应的输出信号被用来基于它们的相应光散射和荧光标记区分不同细胞类型。

用流式细胞术执行免疫分型通常涉及选择一套在生理上适用于预想的评估或监测程序的探针或试剂。与此相关地，由于某些疾病病症可由患者细胞的表面上或细胞内部的各种抗原的表达来表征，故可以选择与这些抗原情形对应的抗体探针试剂面板。例如，Solastra^TM五色试剂面板(Solastra^TM5-Color Reagent Panel)是流式细胞术中使用的表征血淋巴肿瘤的标记抗体混合物的面板。该面板可用于识别相关的白细胞表面分子并对其进行计数，还可用于帮助对某些血液学检测结果异常和/或者血液、骨髓和/或淋巴组织中存在芽细胞的患者进行鉴别诊断。Solastra^TM五色试剂(Solastra^TM 5-Color Reagents)由针对B细胞系抗原、T细胞系抗原和髓单核细胞系抗原的多种抗体构成。此类面板可用于血液病理学应用的流式细胞分析。

用流式细胞术装置测量从中流过的样品会产生散射光、荧光或这两种光的组合的特征性光子标记。分析这种标记，就可能推断颗粒的物理化学特性。通常需检测蛋白质表达情况(示例性颗粒的一种生物学特征)。来自血样的颗粒标记能够以点图的形式呈现，且可运用设门技术来说明这些标记分别是什么标记。一般来讲，运用设门技术将标记分为两类，要么是阳性，要么是阴性。举例来说，可运用设门技术确定某个颗粒是血细胞、还是一片碎屑，或确定该血细胞是否含有疾病标志物。因此，设门技术在诊断应用和临床血液学应用中是重要的。然而，例如，倘若阳性标记和阴性标记的外观相似，则可能难以确定该颗粒应归属于阳性群体还是阴性群体。现已提出多种设门技术或特异性对照技术来帮助确定某颗粒应归类为阳性还是阴性，诸如同种型对照技术、运用聚类分析算法(如主成分分析)的模型，以及荧光扣除对照(FMO)。

虽然目前已知的抗体面板选择技术为执行细胞评估和监测程序的操作员提供了许多益处，但仍需进一步改善该项技术。此外，可改进用于评估样品的设门对照技术。本发明的实施例提供的解决方案能够满足至少一些上述需求。

发明内容