[发明专利]葡糖淀粉酶变体和编码它们的多核苷酸

权利要求书

1.一种葡糖淀粉酶变体，包括在对应于SEQIDNO:3的多肽的位置547、131、262、347、159、162、164、351、353的一个或多个位置的一个取代，其中该变体具有葡糖淀粉酶活性，并且其中该变体与SEQIDNO:3的多肽具有至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的序列一致性。

2.如权利要求1所述的变体，其中取代的数目是1-20个，例如1-10和1-5，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或者10个取代。

3.如以上权利要求中任一项所述的变体，进一步包括在SEQIDNO:3的位置2、4、11、65、79、327、501、504的一个取代。

4.如以上权利要求中任一项所述的变体，其中该变体进一步包括取代P2N+P4S+P11F+T65A+K79V+Q327F+E501V+Y504T。

5.如以上权利要求中任一项所述的变体，其中该变体包括以下取代的组合中的至少一个：

P2N+P4S+P11F+T65A+K79V+D262A+Q327F+E501V+Y504T；或

P2N+P4S+P11F+T65A+K79V+Q327F+L347I+E501V+Y504T；或

P2N+P4S+P11F+T65A+K79V+Q327F+E501V+Y504T+F547K；或

P2N+P4S+P11F+T65A+K79V+G159N+K161S+Q327F+E501V+Y504T；或

P2N+P4S+P11F+T65A+K79V+S162N+V164T+Q327F+E501V+Y504T；或

P2N+P4S+P11F+T65A+K79V+Q327F+D351N+L353T+E501V+Y504T；或

P2N+P4S+P11F+T65A+K79V+G159N+Q327F+E501V+Y504T。

6.一种葡糖淀粉酶变体，包括在对应于SEQIDNO:3的位置P2N+P4S+P11F+T65A+K79V+G220D+Q327F+E501V+Y504T的位置的多个取代，其中该变体具有葡糖淀粉酶活性，并且该变体与SEQIDNO:3的多肽具有至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、例如至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％、但小于100％的序列一致性。

7.如权利要求1-6中任一项所述的变体，该变体相对于该亲本具有一个改进的特性，其中这一改进的特性是对蛋白酶降解的减小的灵敏度。

8.如权利要求1-6中任一项所述的变体，该变体相对于亲本具有一个改进的特性，其中这一改进的特性是增加的热稳定性。

9.一种变体葡糖淀粉酶催化结构域，包括在对应于SEQIDNO:3的多肽的位置547、131、262、347、159、162、164、351、353的一个或多个位置的一个取代，其中该变体具有葡糖淀粉酶活性，并且其中该变体与SEQIDNO:2的氨基酸30至494具有至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的序列一致性。

10.一种组合物，包括如权利要求1-9中任一项所述的变体葡糖淀粉酶。

11.一种如权利要求1-9中任一项所述的变体葡糖淀粉酶用于生产糖浆和/或一种发酵产物的用途。

12.一种用于由含淀粉材料来生产发酵产物的过程，该过程包括以下步骤：

(a)在一种α-淀粉酶存在下使含淀粉材料液化；

(b)糖化液化的物质；并且

(c)使用一种发酵有机体进行发酵；

其中使用如权利要求1-9中任一项所述的一种变体葡糖淀粉酶进行步骤(a)和/或步骤(b)。