[发明专利]使用了重组酵母的乙醇的制造方法在审

专利信息
申请号: 201480010549.7 申请日: 2014-02-27
公开(公告)号: CN105073990A 公开(公告)日: 2015-11-18
发明(设计)人: 大西彻;多田宣纪;保谷典子;片平悟史;石田亘广;名仓理纱 申请(专利权)人: 丰田自动车株式会社
主分类号: C12N15/09 分类号: C12N15/09;C12N1/19;C12P7/06
代理公司: 北京市中咨律师事务所 11247 代理人: 曽祯;段承恩
地址: 日本*** 国省代码: 日本;JP
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摘要:
搜索关键词: 使用 重组 酵母 乙醇 制造 方法
【权利要求书】:

1.乙醇的制造方法,具有以下工序:将导入了木糖异构酶基因和乙醛脱氢酶基因的重组酵母,用含有木糖的培养基进行培养,从而进行乙醇发酵。

2.根据权利要求1所述的乙醇的制造方法,其特征在于,所述木糖异构酶基因是编码以下的(a)或(b)的蛋白质的基因,

(a)具有序列号4所示的氨基酸序列的蛋白质,

(b)具有相对于序列号4所示的氨基酸序列有70%以上的同一性的氨基酸序列、且具有将木糖变为木酮糖的酶活性的蛋白质。

3.根据权利要求1所述的乙醇的制造方法,其特征在于,所述乙醛脱氢酶基因编码来源于大肠杆菌的乙醛脱氢酶。

4.根据权利要求3所述的乙醇的制造方法,其特征在于,所述来源于大肠杆菌的乙醛脱氢酶是以下的(a)或(b)的蛋白质,

(a)具有序列号2或20所示的氨基酸序列的蛋白质,

(b)具有相对于序列号2或20所示的氨基酸序列有70%以上的同一性的氨基酸序列、且具有乙醛脱氢酶活性的蛋白质。

5.根据权利要求1所述的乙醇的制造方法,其特征在于,所述乙醛脱氢酶基因编码来源于拜氏梭菌的乙醛脱氢酶。

6.根据权利要求5所述的乙醇的制造方法,其特征在于,所述来源于拜氏梭菌的乙醛脱氢酶是以下的(a)或(b)的蛋白质,

(a)具有序列号22所示的氨基酸序列的蛋白质,

(b)具有相对于序列号22所示的氨基酸序列有70%以上的同一性的氨基酸序列、且具有乙醛脱氢酶活性的蛋白质。

7.根据权利要求1所述的乙醇的制造方法,其特征在于,所述乙醛脱氢酶基因编码来源于莱茵衣藻的乙醛脱氢酶。

8.根据权利要求5所述的乙醇的制造方法,其特征在于,所述来源于莱茵衣藻的乙醛脱氢酶是以下的(a)或(b)的蛋白质,

(a)具有序列号24所示的氨基酸序列的蛋白质,

(b)具有相对于序列号24所示的氨基酸序列有70%以上的同一性的氨基酸序列、且具有乙醛脱氢酶活性的蛋白质。

9.根据权利要求1所述的乙醇的制造方法,其特征在于,所述重组酵母是进一步导入了木酮糖激酶基因的重组酵母。

10.根据权利要求1所述的乙醇的制造方法,其特征在于,所述重组酵母是导入了下述基因的重组酵母,所述基因编码选自构成戊糖磷酸途径中的非氧化过程的途径的酶群中的酶。

11.根据权利要求10所述的乙醇的制造方法,其特征在于,构成戊糖磷酸途径中的非氧化过程的途径的酶群是核糖-5-磷酸异构酶、核酮糖-5-磷酸-3-差向异构酶、转酮醇酶和转醛醇酶。

12.根据权利要求1所述的乙醇的制造方法,其特征在于,所述培养基含有纤维素,在所述乙醇发酵中,至少同时进行所述纤维素的糖化。

13.根据权利要求1所述的乙醇的制造方法,其特征在于,所述重组酵母高表达具有将乙醛转换为乙醇的活性的醇脱氢酶基因。

14.根据权利要求1所述的乙醇的制造方法,其特征在于,所述重组酵母是具有将乙醇转换为乙醛的活性的醇脱氢酶基因的表达量降低了的重组酵母。

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