[发明专利]增强的转基因表达和加工

权利要求书

1.一种重组核酸分子，所述重组核酸分子包含：

(a)5′端转座子特异性反向末端重复序列(ITR)和3′端转座子特异性反向末端重复序列，

(b)至少一个编码转基因表达加工(TEP)蛋白或TEP功能性RNA的核酸序列，所述核酸序列位于所述5′端ITR与所述3′端ITR之间并且在启动子的控制下，以及

(c)任选的至少一种转基因，所述转基因也位于所述5′端ITR与所述3′端ITR之间并且在转基因启动子的控制下，其中所述核酸分子任选地是载体的一部分。

2.根据权利要求1所述的重组核酸分子，所述重组核酸分子还包含至少一个表观遗传调节元件，特别是至少一个MAR(基质附着区)元件。

3.根据权利要求2所述的重组核酸分子，其中所述MAR元件位于所述5′端ITR与所述3′端ITR之间，并且其中任选地，任选地在另一个启动子控制下的诸如抗生素抗性基因或编码免疫球蛋白的基因之类的转基因位于所述5′端ITR与所述3′端ITR之间，如所述5′端ITR与所述MAR之间。

4.根据前述权利要求中任一项所述的重组核酸分子，其中所述TEP蛋白或TEP功能性RNA是如下的蛋白质或功能性RNA，所述蛋白质或功能性RNA直接地或间接地涉及核酸序列向基因组中的整合、转基因RNA产物的加工或翻译，或涉及诸如转基因表达产物之类的蛋白质的ER易位、分泌、加工、折叠、ER-高尔基体-质膜转运、糖基化和/或另外的翻译后修饰。

5.根据前述权利要求中任一项所述的重组核酸分子，其中所述TEP蛋白是蛋白质分泌途径的蛋白质、重组途径的蛋白质、包括诸如BiP的伴侣蛋白的蛋白质加工或代谢蛋白、或其组合。

6.根据权利要求5所述的重组核酸分子，其中所述TEP蛋白是所述蛋白质分泌途径的以下蛋白质中的一种或多种：hSRP14、hSec61α1、hSec61β、hSec61γ、hSRP54、hSRP9、hSRPRα、hSRPβ、以及hCANX。

所述TEP蛋白还可以对应于所述蛋白质分泌途径的蛋白质的下列氨基酸序列中的一个或多个：具有SEQIDNO：13的hSRP14、具有SEQIDNO：15的hSec61α1、具有SEQIDNO：17的hSec61β、具有SEQIDNO：19的hSec61γ、具有SEQIDNO：21的hSRP54、具有SEQIDNO：23的hSRP9、具有SEQIDNO：25的hSRPRα、具有SEQIDNO：27的hSRPβ、和具有SEQIDNO：29的hCANX以及与所述所指定的序列具有大于80％、90％、95％或98％序列同一性的氨基酸序列。

7.根据权利要求1至5所述的重组核酸分子，其中所述TEP蛋白是以下蛋白质加工或代谢蛋白中的一种或多种：hUCP4、hCMPSAT、rST6Gal1、hCOMSC、hT-合酶、hP4HA1、hP4HB、hGILZ、hCyPB、hNRF2、hHK1、hPDI、hPIN1、hSEPW1、hCALR、hDDOST、hHSP40、hATP5A1、hSERCA2、hPDIA4、hHSC70/HSPA8、hHYOU1、hCMP-SAS、hBeclin-1、hERdj3、CHO-AGE、hWip1、hRTP4、hREEP2、hDPM1以及hDRiP78。

8.根据权利要求1至5所述的重组核酸分子，其中所述TEP蛋白是伴侣蛋白，特别是BiP蛋白质，更特别是与SEQIDNO.：60具有80％、90％、95％或100％序列同一性的合成BIP蛋白质衍生物(DroBiP)。

9.根据前述权利要求中任一项所述的重组核酸分子，其中所述MAR元件选自SEQIDNO：1(MAR1-68)、2(MAR1_6)、3(MARX_S29)、4(MARS4)、5(鸡溶菌酶MAR)，是工程化的，特别是重排的对应物和/或与SEQIDNO：1至5中的任一个具有至少80％、90％、95％、98％、99％或100％的序列同一性。