[发明专利]氨基酸营养缺陷型恢复的原核菌株用于重组产生多肽的用途在审
申请号: | 201480009903.4 | 申请日: | 2014-02-19 |
公开(公告)号: | CN105026575A | 公开(公告)日: | 2015-11-04 |
发明(设计)人: | E·科佩茨基;C·尚茨 | 申请(专利权)人: | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 |
主分类号: | C12P21/02 | 分类号: | C12P21/02 |
代理公司: | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人: | 史文静;黄革生 |
地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 瑞士;CH |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 氨基酸 营养 缺陷 恢复 菌株 用于 重组 产生 多肽 用途 | ||
1.用于在原核细胞中产生多肽的方法,其包括以下步骤:
-在化学成分明确的基础生长培养基中培养原核细胞,并从所述原核细胞或所述原核细胞的细胞周质或从培养基中回收多肽,所述原核细胞已经通过将恢复亲本原核细胞的氨基酸营养缺陷型的核酸引入到亲本原核细胞的基因组内获得,所述原核细胞包含编码多肽的一种或多种核酸。
2.权利要求1的方法,其特征在于相比于亲本非营养缺陷型恢复的原核细胞的培养所需,所述营养缺陷型恢复的原核细胞的培养需要向生长培养基中补充较少的一种或两种或三种或四种氨基酸。
3.权利要求1-2任一项的方法,其特征在于所述营养缺陷型恢复的原核细胞具有至少一种其他氨基酸营养缺陷型。
4.权利要求1-3任一项的方法,其特征在于在培养过程中不添加对应于已经在营养缺陷型恢复的原核细胞中恢复的营养缺陷型的氨基酸。
5.权利要求1-3任一项的方法,其特征在于在缺少对应于已经在营养缺陷型恢复的原核细胞中恢复的营养缺陷型的氨基酸的情况下进行培养。
6.权利要求1-5任一项的方法,其特征在于所述原核细胞是大肠杆菌细胞。
7.权利要求1-6任一项的方法,其特征在于多肽是全长抗体链、单链抗体、单结构域抗体、scFv、scFab、或上述之一与非抗体多肽的缀合物。
8.权利要求7的方法,其特征在于所述多肽是scFv或scFab与细胞毒性剂的缀合物。
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