[发明专利]猪细小病毒5B、用法及疫苗

说明书

序列表

本申请案含有符合37C.F.R.1.821-1.825之序列表。本申请案随附之序列表特此以全文引用方式并入。该ASCII复本系在2013年3月21日创建，命名为10-0153-PCT-SEQ.txt且大小为34,495个字节。

技术领域

本发明属于动物健康领域且涉及新颖猪细小病毒菌株(包括用于接种之减毒菌株)、制造方法及使用自该等新颖细小病毒菌株获得之疫苗之治疗方法。

背景技术

细小病毒感染众多种动物物种且一些细小病毒导致严重临床疾病，但该等病毒中大多数仅引起轻度或亚临床感染。其属于细小病毒科(Parvoviridae)且形成两个亚科：浓核病毒亚科(Densovirinae)，其成员感染昆虫；及细小病毒亚科(Parvovirinae)，其成员感染脊椎动物。后一亚科目前包括5个属：依赖病毒属(Dependovirus)、红病毒属(Erythrovirus)、貂阿留申病毒属(Amdovirus)、博卡病毒属(Bocavirus)及细小病毒属(Parvovirus)(1)。

细小病毒病毒体无包膜且含有约5至6千个碱基(kb)之单股线性DNA基因组。该基因组由编码非结构蛋白及衣壳蛋白之两个主要开放阅读框(ORF)组成。最近阐述之博卡病毒携带位于该两个主要ORF之间之第三ORF(1)。

细小病毒属之典型猪细小病毒(PPV1)菌株广泛分布于世界各处且造成猪之生殖障碍，尤其在未正确地实施接种方案或疫苗功效因免疫抑制因子而下降之畜群中。在过去十年期间，已在猪中检测到多种新细小病毒。该等包括猪细小病毒2(PPV2)(2)及相关病毒(3)。在香港鉴定出一组新的猪及牛细小病毒，即胡可病毒(hokovirus)(PhoV、BHoV)(4)，且发现该等病毒与人类PARV4及5在遗传上相似。尽管其最初系以香港命名为香港病毒，但有人提出新将其PHoV分类为PPV3(5)。PPV4显示与牛细小病毒2相似性最高，但编码容量及基因组组构与博卡病毒之那些相似，因为PPV4同博卡病毒一样编码位于ORF1与ORF2之间之另一ORF3。然而，PPV4编码之推定ORF3蛋白显著不同于博卡病毒编码之推定ORF3蛋白(5)。

业内一直需要监测猪之新病毒之出现且需要针对新病毒研发疫苗、治疗及检测方法。

发明内容

本发明提供新颖核苷酸序列、蛋白序列、免疫原性组合物、疫苗及关于制备及使用尤其感染驯养猪之新细小病毒菌株之方法。该等菌株与在来自临床上发病之驯养猪之组织样品中鉴定之新颖猪细小病毒相关；基于与已知猪细小病毒物种及菌株之序列同源性，将该新颖病毒命名为猪细小病毒5B或PPV5B。

本发明之组合物及方法供以检测由该新病毒导致之感染、监测野生及驯养动物及畜群中病毒序列之遗传改变、及制备及使用新颖疫苗用以保护动物免于感染该病毒。

本发明之免疫原性组合物及疫苗包含由SEQ ID NO:1之核酸序列编码之多肽序列或其免疫原性片段，视情况包括佐剂用以诱导更强的免疫原性反应。

本发明之例示性组合物包含对特异性针对PPV5B之抗体具有免疫反应性之SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ NO:4之多肽序列中之任一者或其片段。本发明之较佳多肽包括SEQ ID NO:4之序列。较佳地，那些多肽或其片段对特异性针对PPV5B之抗体具有免疫反应性。

在另一方面中，本发明提供编码一或多种多肽、抗体构建体或抗体缀合物之核酸序列。编码多肽之基因序列包含与SEQ ID NO:1之序列至少95％、90％、85％或甚至80％同源性及/或相同性之核酸序列，具体而言，编码对特异性针对PPV5B之抗体具有免疫反应性之多肽之SEQ ID NO:1之第2861位第至5014位核苷酸序列(衣壳蛋白)或SEQ ID NO:1之片段。本发明之例示性核酸序列包括编码对特异性针对PPV5B之抗体具有免疫反应性之多肽之SEQ ID NO:1之第935位至第2024位核苷酸、SEQ ID NO:1之第2161位至第2860位核苷酸及SEQ ID NO:1之第2861位至第5014位核苷酸之序列中之任一者及其片段。较佳地，该等核酸序列或基因系编码对特异性针对PPV5B之抗体具有免疫反应性之多肽或肽之那些。

此外，本文所用本发明之多肽包括但不限于包含以下多肽：