[发明专利]耐热性纤维二糖水解酶有效
| 申请号: | 201480005293.0 | 申请日: | 2014-03-27 |
| 公开(公告)号: | CN105073987B | 公开(公告)日: | 2018-05-18 |
| 发明(设计)人: | 须田汀;大熊二郎;山口明日香;广濑佳嗣;近藤康弘;加藤友彦;柴田大辅 | 申请(专利权)人: | 本田技研工业株式会社;公益财团法人上总DNA研究所 |
| 主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;A01H5/00;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N9/14;C12P19/14;A01H6/20 |
| 代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 谢顺星;张晶 |
| 地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 耐热性 纤维 糖水 | ||
1.一种耐热性纤维二糖水解酶,其由(A)序列号1所示氨基酸序列、(D)序列号3所示氨基酸序列、(G)序列号5所示氨基酸序列、或者(J)序列号7所示氨基酸序列组成。
2.一种耐热性纤维二糖水解酶,其由序列号19所示氨基酸序列组成。
3.一种多核苷酸,其为下列任一种碱基序列的多核苷酸:
(a)编码序列号1所示氨基酸序列的碱基序列;
(d)编码序列号3所示氨基酸序列的碱基序列;
(g)编码序列号5所示氨基酸序列的碱基序列;
(j)编码序列号7所示氨基酸序列的碱基序列。
4.一种多核苷酸,其由编码序列号19所示氨基酸序列的碱基序列组成。
5.一种表达载体,其整合了根据权利要求3或4所述的多核苷酸,在宿主细胞中可表达至少在75℃、pH5.5的条件下具有纤维二糖水解酶活性的多肽。
6.一种转化体,其是在原核生物中导入有根据权利要求5所述的表达载体。
7.一种转化体,其是在真核微生物、昆虫培养细胞、哺乳动物培养细胞中导入有根据权利要求5所述的表达载体。
8.一种耐热性纤维二糖水解酶的制造方法,在根据权利要求6或7所述的转化体中生产耐热性纤维二糖水解酶。
9.一种纤维素酶混合物,其含有根据权利要求1所述的耐热性纤维二糖水解酶、根据权利要求2所述的耐热性纤维二糖水解酶、或者利用根据权利要求8所述的耐热性纤维二糖水解酶的制造方法制得的耐热性纤维二糖水解酶及至少一种以上的其他纤维素酶。
10.根据权利要求9所述的纤维素酶混合物,所述其他纤维素酶为选自由半纤维素酶及内切葡聚糖酶构成的组中的一种以上。
11.一种纤维素分解产物的制造方法,使含有纤维素的材料与根据权利要求1所述的耐热性纤维二糖水解酶、根据权利要求2所述的耐热性纤维二糖水解酶、根据权利要求6或7所述的转化体、或者利用根据权利要求8所述的耐热性纤维二糖水解酶的制造方法制得的耐热性纤维二糖水解酶接触,由此生产纤维素分解产物。
12.根据权利要求11所述的纤维素分解产物的制造方法,使所述含有纤维素的材料进一步与至少一种其他纤维素酶接触。
13.根据权利要求12所述的纤维素分解产物的制造方法,所述其他纤维素酶为选自由半纤维素酶及内切葡聚糖酶构成的组中的一种以上。
14.一种编码耐热性纤维二糖水解酶的多核苷酸的制造方法,以含有序列号2、4、6或8所示碱基序列的多核苷酸为模板,使用正向引物和反向引物进行PCR,作为扩增产物,得到含有编码耐热性纤维二糖水解酶的碱基序列的多核苷酸,所述正向引物由序列号12所示碱基序列或序列号14所示碱基序列形成,所述反向引物由序列号13所示碱基序列形成。
15.一种引物对,其由序列号12所示碱基序列或序列号14所示碱基序列形成的引物与由序列号13所示碱基序列形成的引物构成。
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