[实用新型]狂犬疫苗接种效果快速评价试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型属于生物检测领域，具体涉及一种狂犬疫苗接种效果快速评价试剂盒。

背景技术

狂犬病是病毒性人畜共患病，在100多个国家和地区均有发生。99％的人狂犬病都来自病犬，犬狂犬病对超过33亿人构成潜在的威胁。人感染后一旦出现临床症状，几乎100％致命。每年大约有5.5万人死于狂犬病，绝大多数死亡发生在亚洲和非洲的农村地区。仅印度一个国家，估计每年死亡人数为2万(即死亡率约为2/10万)，而非洲地区每年死亡率更高，约为4/10万。

狂犬病毒属弹状病毒科的狂犬病毒属。人通常在被带毒动物咬伤或抓伤皮肤后发生感染。该病也可通过感染性物质(通常为唾沫)直接接触受害者的粘膜或新近皮肤破损处传染，其他方式的感染较为罕见。该病的潜伏期通常为1-3个月，短则不到一周，长则一年以上。潜伏期长短取决于感染的病毒数量、病毒侵入处的神经分布和咬伤部位与中枢神经系统的距离等因素。病毒经周围神经可传递至中枢神经系统，一旦到达大脑，就迅速复制并扩散，经神经系统扩散至许多不同的组织，出现临床症状时，病毒已遍布全身。

自40多年前，经浓缩纯化的细胞培养和鸡胚培养的狂犬病疫苗研制成功以来，已被证实可安全有效地预防狂犬病。这些疫苗既可用于暴露前预防，也可用于暴露后预防，并已为全球无数人接种。目前可获得的狂犬病疫苗均可迅速诱导出针对狂犬病毒G蛋白的高水平的病毒中和抗体反应。但我们仍有必要对狂犬病疫苗的免疫效果进行评价。世卫组织规定的血清病毒中和抗体最低保护滴度为0.5IU/ml，已被广泛用作参考值。当前市场上检测狂犬抗体的商品化试剂盒多采用酶联免疫法和化学发光法，这些方法虽然灵敏度高、结果准确、化学发光试剂还可以对抗体进行定量，但在实际操作上存在诸多不便，如步骤复杂、耗时较长，还需使用特定的仪器设备；试剂盒需4℃保存；对样品要求静脉采血等，不易在基层普及运用。

免疫胶体金快速诊断技术是建立在酶联免疫吸附试验、乳胶凝集试验、单克隆抗体技术和免疫胶体金标记技术基础上，以胶体金为标记物，利用特异的抗原抗体反应放大反应信号,通过直接观察就可以判定结果的新技术。该技术具有简单、快速、准确和无污染等优点，在临床医学检测、动物医学检测、激素检测、食品安全检测、药物残留和毒品快速检测等诸多诊断领域迅速发展。目前，胶体金标记的快速检测抗体的检测试纸都是由样品垫、标记物结合垫、包被膜(其上划有检测线、质控线)和吸收垫组成，根据检测原理的不同大体分为两种：一种是将抗原标金，在标记物结合垫上包被胶体金标记的抗原，在包被膜上用待测抗体的抗体划膜得到检测T线；另一种是将抗原划膜，在标记物结合垫上包被胶体金标记的待测抗体的抗体，在包被膜上用抗原划膜得到检测T线。现有研究表明：因为抗体蛋白性质较为稳定，所以对抗体蛋白的胶体金标记较为稳定，因此上述第一种方法所述的抗原的胶体金标记则存在颇多问题，因为抗原多为病毒类，性质多样，有的大小甚至比胶体金颗粒还大，且稳定性较差，因此很难直接将抗原标记在胶体金颗粒上；即使勉强能将抗原标记上，也需要抗原达到极高的纯度，而对抗原病毒的纯化是一项难度较大、成本较高的工程；也有人寻找抗原的重组抗原来代替这些天然抗原，但是很多抗原很难寻到能替代的重组抗原，而且即使有，成本也是极高的，由此说明，上述第一种方法的局限性比较高。上述的第二种方法使用待测抗体的抗体进行金标记，这种方法可以避免抗原金标记的问题，但在包被膜上使用抗原划膜得到检测T线，需要抗原具有较高的浓度和纯度，这也增加了产品生产的成本和难度；另外将抗原划到膜上，由于抗原稳定性较差，抗原划膜后很难长时间保存，因此试纸条的有效期极短。这些都是限制抗体快速检测类试剂盒快速发展的原因。

发明内容

本实用新型针对现有技术的不足，目的在于提供一种狂犬疫苗接种效果快速评价试剂盒，

用该试剂盒对接种者体内血清中的狂犬病毒IgG抗体进行胶体金法快速检测，可以实现对狂犬疫苗接种效果的快速评价。

本使用新型所采用的技术方案为：

狂犬疫苗接种效果快速评价试剂盒，包括盒体、装有样品稀释液的容器和检测试纸，所述装有样品稀释液的容器和检测试纸位于盒体内，其特征在于，所述检测试纸是由底板和相互紧密搭接粘贴在底板上的样品垫、抗原垫、标记物结合垫、包被膜和吸收垫组成，所述抗原垫上包被有狂犬病毒抗原，所述标记物结合垫上包被有胶体金标记的鼠抗狂犬单克隆抗体，所述包被膜上固定有检测T线和质控C线，所述检测T线上包被有鼠抗人IgG抗体，所述质控C线上包被有羊抗鼠IgG抗体；所述检测试纸的最低检测线为0.5IU/ml。