[实用新型]一种用于肝组织体外循环灌流消化的实验仪器

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种实验仪器，尤其涉及一种用于肝组织体外循环灌流消化的实验仪器。

背景技术

在对肝脏相关疾病的实验研究中，从实验动物甚至人的肝组织中分离培养肝细胞、库普否细胞、肝星状细胞等肝组织中的细胞是必不可少的实验方法。目前从实验动物体内分离这些细胞往往采用的是原位循环(体内循环)消化的方法，具体方法是：将实验动物麻醉后，腹部消毒，打开腹腔，暴露门静脉及下腔静脉，行门静脉插管，经门静脉插管灌注平衡盐液(灌注液)，并剪开下腔静脉放血，待肝脏中血液冲净、肝脏呈黄色后停止灌注平衡盐液，开始灌注有消化作用的酶溶液(一般为胶原酶)。灌注酶溶液时，需切开胸廓，暴露心脏，剪开右心房，将一导管逆行插入腔静脉横膈上方，结扎，下腔静脉放血处用止血钳夹紧；使酶溶液从腔静脉导管流出，将腔静脉导管流出液回收进胶原酶溶液瓶，循环灌注。此外，还需尽量结扎肝与膈肌之间的侧支循环血管，以减少酶的流失。通过原位循环消化，酶溶液将肝组织内胶原组织消化，使细胞易于分散，便于细胞的分离。但这种原位循环消化方法存在以下缺点：1、实验中手术操作难度大，不易掌握；2、循环灌流过程中，部分酶溶液会经肝包膜渗出，无法经腔静脉导管回流；且肝与膈肌之间存在侧支循环血管，且有的较细，不可能将所有的侧支完全结扎，循环过程中酶溶液也会经未结扎的侧支血管流走，故这种循环方法必然有大量昂贵的消化酶损失；3、原位灌注消化后的肝包膜软化、极易破裂，一旦肝包膜破裂，则容易导致细胞损失或污染，进而导致实验失败。为了使手术操作简单化，有学者将上述方法进行了改进，改进的方法为：于下腔静脉处做一插管，待肝脏中血液冲净、换用含酶消化液进行灌注时，将下腔静脉插管接入酶溶液瓶，循环灌注。这种方法减少了一些操作步骤，适当降低了手术难度，但仍需做下腔静脉插管，且可能存在循环灌注过程中消化酶丢失更多的问题，同时，消化后的肝脏从动物体上取下时仍存在肝包膜破裂所致的细胞损失及易污染等致命缺陷。

申请号为“200410084625.7”的专利申请公开了一种“生物人工肝用猪和人肝细胞的制备方法”，虽然其公开了可采用体外循环的方法来分离肝细胞，但是该申请仅仅描述了提取肝细胞的方法(包括分离方法中的条件、试剂、时间、步骤等)，并未公开任何关于体外循环灌流装置的内容,因而无法在实际应用时进行实施；

申请号为“01210227719.X”的专利申请公开了“一种用于体外灌流法的重金属吸附剂及其制备方法”，虽然其也涉及“体外灌流”，但是其仅仅指全血体外灌流，目的是用于吸附血液中重金属离子，因而并不适用于分离肝组织中的各种细胞及对肝组织中各种细胞的生物学特性进行相关实验研究。

申请号为“201410142209.1”的专利申请公开了一种“器官脱细胞循环灌流再生培养瓶”，虽然其也涉及循环灌流，但是该装置主要是用于脱细胞时去除细胞而保留器官支架(器官支架主要是一些胶原组织，实验中器官上的细胞被消化、脱落下来，留下支架)，而且其整个脱细胞过程需要3-5天，因而这些细胞脱落后已基本失活或严重受损，后期培养的成功率也极低，因而该培养瓶并不适用于分离肝组织中的各种细胞及对肝组织中各种细胞的生物学特性进行相关实验研究。因而目前急需一种体外循环灌流实验仪器，来实现分离肝组织中的各种细胞以用于对肝组织中各种细胞的生物学特性进行相关实验研究，根据检索，申请人并未发现有能解决上述问题的实验仪器公开。

实用新型内容

本实用新型的目的在于，提供一种用于肝组织体外循环灌流消化的实验仪器，它可以有效解决现有技术中存在的问题，用于快速分离肝组织中的各种细胞及实现对肝组织中各种细胞的生物学特性进行相关实验研究。

为解决上述技术问题，本实用新型采用如下的技术方案：包括恒温箱和设于恒温箱内的灌流回路，所述的灌流回路包括：顺次连接的盛放肝组织容器、蠕动泵装置、三通管、过滤装置和无菌管道；所述的蠕动泵装置包括蠕动泵及与蠕动泵对应的柔性管道，柔性管道绕过对应的蠕动泵并且两端分别与盛放肝组织容器和三通管连通。

上述的无菌管道具有一定的硬度，并且包括粗细不等的几种型号，可用于行门静脉插管，如静脉留置针去芯、聚乙烯管、静脉输液针去针等。

本实用新型中所述的柔性管道应设计成可消毒的，因为柔性管道内流动的液体直接与肝组织接触，为保证分离到的细胞无菌，所有与肝组织接触的器皿都应是无菌的；同时该管道可重复使用，因而也有必要将其设计成可消毒的。

优选的，所述的恒温箱的温度为37～39℃，从而可以使得在含酶灌注液时使得酶的活性较高。