[实用新型]一种高效免疫印迹反应器有效
| 申请号: | 201420563089.8 | 申请日: | 2014-09-28 |
| 公开(公告)号: | CN204188614U | 公开(公告)日: | 2015-03-04 |
| 发明(设计)人: | 曹亮 | 申请(专利权)人: | 南京钟鼎生物技术有限公司 |
| 主分类号: | G01N33/544 | 分类号: | G01N33/544 |
| 代理公司: | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人: | 贺翔 |
| 地址: | 210000 江苏省南京市六合区*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 高效 免疫 印迹 反应器 | ||
技术领域
本实用新型涉及一种在免疫印迹(Western Blot)实验中用于将硝酸纤维素膜与抗体溶液共孵育及洗杂的装置,具体涉及一种高效免疫印迹反应器。
背景技术
免疫印迹实验是当前生物科研中常用技术,在实验中蛋白质经聚丙烯酰胺凝胶电泳后被转移并固定在硝酸纤维素膜上,将硝酸纤维素膜与蛋白特异性抗体溶液共孵育后,经漂洗去除未反应的抗体,加入二抗孵育洗涤显色等步骤即可观察抗体与蛋白中特异抗原成份的结合,其中,硝酸纤维素膜与抗体溶液共孵育是实验的关键步骤之一(在这一步骤中使用的抗体是珍贵且昂贵的消耗性试剂,需尽量节省使用),但是抗体溶液必须达到一定浓度才可使实验达到满意效果,所以,节省抗体的重要方法之一是减小抗体溶液的使用体积,使硝酸纤维素膜刚好完整浸没于抗体溶液之中即可。
目前,抗体孵育步骤多在密封塑料袋或盒状容器中进行,使用密封塑料袋的优点是:袋的大小可根据硝酸纤维素膜的大小任意裁切,将孵育面积降至最低限度(仅比膜面积稍大),但使用密封塑料袋时很难保证没有气泡被封入袋中,因抗体溶液粘稠度较大,表面张力较高,即使在摇床上不停摇动,被封入袋中的气泡仍有可能粘附于膜表面特定位置,而造成该位置与抗体反应不够充分,影响试验质量;在盒状容器中进行孵育时,抗体溶液流动较好,易于保证膜表面各处与抗体接触的均一性,但在摇床的晃动下,硝酸纤维素膜容易漂浮起来,使部分膜表面脱离抗体溶液而暴露与空气中,在实际操作中,经常不得不加大抗体溶液体积以获得更好的液体流动性来解决这一问题,而较大的体溶液体积意味着更多的抗体消耗,另外因各批次试验样品数量不一、膜的大小不等,在现实中很难准备多个大小不等的盒子以适应膜的大小(通常都是使用一个较大的盒子),这样当膜的面积较小时又造成了抗体的浪费;抗体孵育每次需要在37度条件下震荡反应1小时,一般免疫印迹一抗反应洗涤后还需二抗反应,共需要2小时,抗体孵育完成后需要用洗涤液反复漂洗硝酸纤维素膜,去除未结合的抗体,一般需要洗涤4-5次,每次5-10分钟,当前抗体孵育洗涤步骤繁琐耗时且浪费试剂。
因此,基于上述问题,本实用新型提供一种简单、易用的高效免疫印迹反应 器。
实用新型内容
实用新型目的:本实用新型的目的一种高效免疫印迹反应器,一方面通过负压作用于抗体溶液和洗涤溶液穿透硝酸纤维薄膜,从而达到快速反应和洗涤的目的,另一方面抗体溶液和洗涤溶液通过吸附在微孔海绵垫上以减少试剂用量,密闭容器通过负压将海绵垫中的溶液挤压穿透硝酸纤维薄膜,达到反应和洗涤的目的,较传统的浸泡法反应、清洗效率高。
技术方案:一种高效免疫印迹反应器,包括盒体,及设置在盒体上的盒盖,及设置在盒体内底部的过滤层,及与盒体底部连接废液连接管,及与废液连接管连接的废液收集皿,及通过抽真空连接管与废液收集皿连接的抽真空装置。
本技术方案的,所述盒体为透明有机玻璃。
本技术方案的,所述设置在盒体内底部的过滤层为石英砂滤垫,其厚度为0.3-0.5cm。
本技术方案的,所述盒体底部连接废液连接管为漏斗状。
本技术方案的,所述抽真空装置为小型双级旋片式真空泵。
与现有技术相比,本实用新型的一种高效免疫印迹反应器的有益效果在于:1、结构简单、外形美观;2、一方面通过负压作用于抗体溶液和洗涤溶液穿透硝酸纤维薄膜,从而达到快速反应和洗涤的目的,另一方面抗体溶液和洗涤溶液通过吸附在微孔海绵垫上以减少试剂用量,密闭容器通过负压将海绵垫中的溶液挤压穿透硝酸纤维薄膜,达到反应和洗涤的目的,较传统的浸泡法反应、清洗效率高。
附图说明
图1是本实用新型一种高效免疫印迹反应器的结构示意图;
其中图中序号如下:1-盒盖、2-盒体、3-过滤层、4-废液连接管、5-废液收集皿、6-抽真空装置、7-抽真空连接管。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例,进一步阐明本实用新型。
如图1所示的一种高效免疫印迹反应器,包括盒体2,及设置在盒体2上的盒盖1,及设置在盒体2内底部的过滤层3,及与盒体2底部连接废液连接管4, 及与废液连接管4连接的废液收集皿5,及通过抽真空连接管7与废液收集皿5连接的抽真空装置6。
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