[实用新型]用于检测急性B淋巴细胞白血病残留的试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型属于流式细胞术检测领域，具体地涉及一种采用流式细胞仪检测急性B淋巴细胞白血病残留病灶的试剂盒。

背景技术

急性淋巴细胞白血病(ALL)是急性白血病的一种类型。ALL是儿童最常见的白血病类型，成人发病率较低，占成人急性白血病的15％～25％，老年人患病率更低，占急性淋巴细胞白血病的14％左右。急性淋巴细胞白血病中，急性B淋巴细胞白血病居多，治疗效果和预后较急性T淋巴细胞要好。对于急性B淋巴细胞白血病治疗后残留白血病细胞的检测有助于监测治疗的疗效，预防疾病的复发。

微小残留病灶(MRD)检测：达到完全缓解后要定期检测微小残留病灶,尤其是急性白血病治疗达到完全缓解后，用常规的形态学方法不能检测到明显的白血病细胞，但此时体内仍存在少量的白血病细胞，一般来说，即使白血病达到完全缓解，仍要继续治疗，并定期检测MRD，根据MRD的水平调整治疗方法、方案及治疗时间，从而达到治愈的目标。以急性白血病为例，初发病时，体内白血病细胞总数达1012以上，化疗后60％以上的成人患者可得到完全缓解(CR)，但刚CR时，即使骨髓及血液查不到明显的白血病细胞，骨髓原始细胞<5％，但体内白血病细胞总数仍有10^7-9；继续治疗，如果这些MRD不能被清除，最终导致复发，MRD是白血病复发的根源。MRD的水平是判断治疗效果的关键指标，MRD升高可提前预示恶性血液病的全面复发，因此要定期检测MRD，来帮助选择治疗方式、治疗周期及方案。

目前检测MRD主要采用细胞形态学、流式细胞术(FCM)、染色体核型分析及基因分析方法。其中，染色体核型分析的检测周期长，灵敏度低，一些急性淋巴细胞白血病的患者可能由于疾病本身导致细胞无法在体外被培养，无法得到可供分析的分裂相；且部分急性白血病患者是正常核型，无法用于治疗后的微小残留病灶检测

定量PCR检测治疗后的微小残留病灶，需要初诊时即进行定量PCR检测，找出异常的特异基因，比如BCR-ABL，PML-RARa等，在治疗后跟踪检测这些特异基因的变化，以此反映疾病的分子生物学缓解或进展；但是部分急性白血病患者无特异的基因异常用于做定量PCR检测微小残留病灶；另外，标本质量欠佳时，核酸降解可影响检测结果，导致假阴性。

细胞形态学检测的灵敏度低，一般只在镜下观察分析200个细胞。而且多数时候无法区分骨髓中正常的幼稚B细胞和异常的幼稚B细胞。急性白血病在治疗之后的免疫重建阶段，骨髓中会产生正常的幼稚B细胞，儿童在治疗后恢复阶段的正常幼稚B细胞甚至可以达到30-40％，不能区别正常幼稚和异常幼稚细胞，会导致误诊。

4色流式细胞术检测中4色技术限制了该检测的应用，一般在分析时每一管都需要用CD45和CD19来圈门，圈出需要分析的B细胞群；CD45、CD19要占两色，剩下就只有两色组合用于观察细胞抗原的分化表达是否是正常的，在需要同时看多种抗原共表达或不共表达表型的时候就会出现局限。4色技术一般需要3管来完成急性B淋巴细胞白血病细胞相关抗原检测，在标本量不够时，比如用于脑脊液检测时，就会导致缺乏足够的标本来检测。

实用新型内容

为了解决上述技术问题，本实用新型的目的在于提供一种用于检测急性B淋巴细胞白血病残留病灶的试剂盒，可以快速、准确地检测急性B淋巴细胞白血病残留。

为实现上述目的，本实用新型采取的技术方案是：一种用于检测急性B淋巴细胞白血病残留病灶的试剂盒，包括盒体(1)、盒盖(3)和设置在盒体(1)内的衬垫(2)，所述衬垫(2)上设有小孔，装有抗体CD45V500的试剂管(4)、装有抗体CD123BV421的试剂管(5)、装有抗体CD58FITC的试剂管(6)、装有抗体CD10PE的试剂管(7)、装有抗体CD19APC的试剂管(8)、装有抗体CD38PE-CY7的试剂管(9)、装有抗体CD34Pecy5的试剂管(10)、装有抗体CD20APC-Cy7的试剂管(11)、装有红细胞裂解液的试剂管(12)、装有PBS缓冲液的试剂管(13)被设置在所述小孔内。

根据本实用新型的实施例，所述试剂盒还包括：装有去离子水的试剂管(14)。

根据本实用新型的实施例，所述衬垫(2)上设有11个小孔，所述小孔在所述衬垫(2)上分成3排平行排列。

通过以上技术方案，本实用新型的有益效果如下：

本实用新型的技术方案解决了4色流式细胞术检测急性B淋巴细胞白血病的缺点，更节省标本，检测步骤更简单，速度更快，检测结果更全面，提高了检测的灵敏度。

附图说明