[实用新型]一种磷酸化多肽的纯化装置

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种磷酸化多肽的纯化装置，属于化学纯化技术领域，具体地说是一种填装二氧化钛纳米粒子的磷酸化多肽的减压纯化装置。

背景技术

蛋白质的磷酸化修饰几乎调节着生命活动的所有过程，包括细胞的增值、发育和分化、神经活动、肌肉收缩、新陈代谢、肿瘤发生等。对磷酸化的认识有助于我们了解疾病的发生过程。而磷酸化多肽则是体现其母体蛋白磷酸化过程结构变化的最好模型，从而在寻找预防和治疗各种疾病的有效药物方面，具有重大的现实意义，因此磷酸化多肽具有重要研究价值。然而，磷酸化多肽在天然样本中含量极低，介于其重要的研究价值，从七十年代末期开始，磷酸化多肽的人工合成得到许多化学家的重视。然而，要得到纯的单一肽，尤其是制备大量的色谱行为相近的多肽纯品，是人工合成并纯化多肽的一项重要而又艰巨的环节。近期，二氧化钛(Ti0₂)金属氧化物富集技术得到了人们极大的关注，但目前已报道的用于二氧化钛分离的装置都是做成微柱(spin column)、二氧化钛板(“A novel titanium dioxide-polydimethylsiloxane plate for phosphopeptide enrichment and mass spectrometry analysis”，《Analytica ChimicaActa》，P105-113，2014年)、色谱柱(申请号201310253448、200810211727.9)等，这些技术主要在蛋白质组学领域中对生物样本中的天然磷酸化多肽进行微量相对富集，以便提高磷酸化多肽在质谱中的检出率，尚停留在微量磷酸化多肽分析水平的纯化，操作原理主要基于离心机的离心力或加压而进行的，目前的装置尚不能满足化学合成的磷酸化多肽的大量纯化。

实用新型内容

本实用新型专利是针对化学法合成磷酸化多肽的大量纯化的实际需要提供的一种磷酸化多肽的纯化装置。在利用二氧化钛能特异性吸附磷酸化多肽的基础上，设计了一种磷酸化多肽的纯化装置，该装置主要是用减压吸入和减压过滤的原理结合20μm的砂板使溶液能滤过，但能截留大于20μm的物质而设计的。

其方案为：一种磷酸化多肽的纯化装置，该装置包括纯化玻璃管1、混悬仪2、接收瓶3、真空泵4、铁架台5五部分。

其中纯化玻璃管包括进样口6、清洗液和洗脱液入口7、储液室8、清洗液和洗脱液出口9、进样口盖10、孔隙20μm的砂板11、三通阀门12；储液室8被孔隙20μm的砂板11分割成两个空间上储液室和下储液室；三通阀门12有三个孔隙，孔隙的设置确保当一个孔隙与下储液室底部的孔隙相通时，另两个孔隙与清洗液和洗脱液入口7、清洗液和洗脱液出口9也同时接通，当无任何孔隙与下储液室底部的孔隙相通时，其它两个孔隙也不与清洗液和洗脱液入口7、清洗液和洗脱液出口9相通；进样口盖10通过内螺纹与储液室8相连；

其中混悬仪2包括转盘13、电机14、转速旋钮15、底座16，纯化玻璃管1通过插入转盘13的圆孔中固定到混悬仪2上，利用混悬仪的旋转，使纯化玻璃管1上下颠倒，达到样品与二氧化钛充分接触吸附、清洗液与样品充分接触洗涤、洗脱液与样品充分接触洗脱的目的；

其中真空泵4与清洗液和洗脱液入口7相连，清洗液和洗脱液通过减压便可吸入纯化玻璃管的储液室8；

其中接收瓶3为设有主口和侧口的两口瓶，主口17与清洗液和洗脱液出口9相连，侧口18为带有阀门的抽气口。清洗液和洗脱液通过减压过滤，进入接收瓶3，侧口18阀门主要是调节压力的。

纯化操作过程主要包括：上样操作、洗涤操作、洗脱操作。上样后磷酸化多肽被吸附到二氧化钛表面，并随二氧化钛一起被孔隙20μm的砂板11截留在上储液室，未被吸附的物质随溶液滤过20μm的砂板11到接收瓶3中；通过洗涤操作，未被吸附的物质，进一步被清洗液洗涤滤过20μm的砂板11到接收瓶3中，而磷酸化多肽仍被吸附在二氧化钛表面，并被孔隙20μm的砂板11截留在上储液室；最后通过洗脱操作，磷酸化多肽溶解到洗脱液中，滤过孔隙20μm的砂板11流入接收瓶3中，完成磷酸化多肽的纯化。

本实用新型的有益效果是：

1、接收瓶3与清洗液和洗脱液出口9相连，清洗液和洗脱液通过减压过滤，进入接收瓶，使清洗和洗脱过程更彻底，而且相比离心力原理，减压过滤的原理可以去除大容量的清洗液和洗脱液，从而实现化学合成的磷酸化多肽的大量纯化。