[实用新型]一种大、小鼠胚胎移植用的胚胎移植器

说明书

技术领域

本实用新型属于动物胚胎移植用的胚胎移植器，特别是大、小鼠胚胎移植用的胚胎移植器。

背景技术

大、小鼠作为发育生物学及疾病研究中探索基因功能的一种重要的实验动物，对大、小鼠基因组进行遗传修饰涉及胚胎移植( Embryo Transfer，ET，又称受精卵移植) ，即将其体内、外生产的早期胚胎移植到生理状态相同的受体鼠生殖道内，使之继续发育成正常个体。胚胎移植成功与否取决于胚胎的质量、受体鼠是否成功假孕、移植的方法及操作熟练程度等因素，在此过程中，采用合适孔径、方便操作的胚胎移植器对于成功收集和保护早期胚胎，以及将胚胎移植到受体鼠生殖道尤为重要。

目前市售的胚胎移植管一般为进口产品，价格较贵。也有研究者使用巴氏管制作的口吸管进行操作，但口吸管较难控制胚胎液的收集量，而且制备难以规范。

发明内容

本实用新型旨在提供一种工作效率高、质量稳定、使用方便、无菌控制好、且制备简易的胚胎移植器。

本实用新型的胚胎移植器所述目的用以下方式达到：

它由胚胎收集管（2）、软接头（3）、软管（4）、注射器（5）组成，其中：

 胚胎收集管（2）为经环氧乙烷消毒灭菌过的12cm长的毛细玻管，其靠管尖端口（1）的1/3~1/2位置处呈110°~120°，管尖端口（1）为内径Φ300～400μm的钝化口，以便于在倒置显微镜或体视镜下手动吸取胚胎；

胚胎收集管（2）通过软接头（3）与软管（4）的一端（41）连接，软管（4）的另一端（42）连接1～4mL注射器（5）的入射口。

所述胚胎移植器的注射器（5）为1mL。

本实用新型之胚胎移植器具有的有益效果和技术进步在于：

 其胚胎收集管尖端钝化为内径为Φ300～400μm可减少管尖端口对子宫及输卵管的损伤，避免对胚胎造成损伤，又不会因为口径过大造成移植过程中胚胎的丢失。注射器和胚胎收集管用软接头及软管连接，连接的软接头及软管可起到缓冲作用。倒置显微镜的物镜与载物台之间的工作距离为6~7cm，胚胎收集管靠管口尖端1/3~1/2段炙烤成具有110°~120°角度有利于在倒置显微镜和视镜下观察胚胎的形态结构后直接收集胚胎，进行大、小鼠的子宫移植，而其他类型的胚胎移植器则较适合于在工作距离6cm~12cm的体视镜下进行胚胎收集的操作。

本实用新型制备方法简易可以在以下具体实施方式中得到说明，而其质量稳定、使用方便、无菌控制好、且工作效率高等特点在以下具体实施方式下之操作实例中看到。

附图说明

  图1是本实用新型的结构示意图，图中包括：管尖端口1、胚胎收集管2、软接头3、软管4、注射器5，以及软管4的两端41，42。

具体实施方式

实施例1：

胚胎收集管1为经环氧乙烷消毒灭菌过的内径1mm的12cm长的毛细玻管，毛细玻管的靠管口尖端1/3位置呈120°以便于在倒置显微镜或体视镜下手动吸取胚胎，钝化的管口尖端1内径为Φ350μm

胚胎收集管2通过软接头3与软管4的一端41连接，软管4的另一端42连接1mL注射器5的入射口。

以上软接头3与软管4为橡胶材料。

实施例2：

制备胚胎收集管：取经过环氧乙烷消毒灭菌过的约12cm长的毛细玻管，在接近管尖位置用酒精灯加热；当加热部分颜色发红并变得非常柔软后，移除火焰，迅速用小镊子将其尖端拉细，防止融化堵塞，外力断成平且钝化的管口1，管口尖端1内径为Φ300～400μm，冷却后，再将毛细玻管的靠管口尖端1之1/3处炙烤具有110～120°角度，该角度便于在倒置显微镜及体视镜下手动吸取胚胎，即完成了胚胎收集管1的制备；

制备胚胎移植器：将橡胶管4的接头一端42连接注射器5的入射口，橡胶管4的另一端41通过橡胶接头3与胚胎收集管2连接。

操作实例：

利用所制备的胚胎移植器直接在倒置显微镜或体视镜下，用注射器联通的胚胎收集管，手动先吸取约0.5cm长的培养液（不含胚胎），然后再吸0.5cm的空气段，最后吸取所挑选的质量符合标准的胚胎。

将假孕小鼠于超菌工作台上注射1%的戊巴比妥钠溶液0.2ml麻醉后，进行俯卧位保定，用碘酒棉擦拭小鼠的背部，在离髂骨1.5cm和离背部中线1cm处，剪去背毛，用酒精棉擦拭，用小剪刀见开1cm的切口，看见白色脂肪块，轻拉即引出卵巢、输卵管和子宫，在宫管结合处用26gauge注射器针头戳一个小孔，确认针进入腔内而不是子宫壁内，拔出针，将装有胚胎的胚胎收集移植管由此孔插入子宫约5mm，利用注射器推力轻轻将含有胚胎溶液段打进子宫直至空气段，静置20s左右，后缝合伤口。注意胚胎收集管中所吸入的含胚胎的培养液一定要少，打入子宫的培养液也一定要少，而且要挑选透明带完整的胚胎移植。