[实用新型]一种β-微管蛋白Ⅲ基因表达检测试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种检测试剂盒，尤其是涉及一种β-微管蛋白Ⅲ基因表达检测试剂盒。

背景技术

微管是一类含有聚合的α/β异二聚体以及大量的微管相关蛋白的细胞骨架结构，它们在许多细胞功能中至关重要其中包括细胞分裂。大量癌症患者均存在异常的细胞分裂，因此微管被人们作为肿瘤治疗的靶点。目前，抗微管类药物已在肿瘤治疗中广泛使用，抗微管类药物是通过作用于细胞微管而影响纺锤体形成，并抑制细胞有丝分裂的一类广谱化疗药。目前常用的抗微管类药物主要有：紫杉醇、多西他赛、长春碱、长春新碱和长春瑞滨等。紫杉醇/多西他赛作用于肿瘤细胞后，可以促进肿瘤细胞内的微管聚合以及稳定已聚合的微管，导致细胞内大量微管聚集，进而干扰细胞各种功能，特别是使细胞停止分裂（如图）。长春碱/长春新碱等可以抑制肿瘤细胞内微管蛋白的聚合、抑制纺锤体微管的形成，使核分裂停滞于细胞分裂中期，从而抑制肿瘤细胞生长。

微管蛋白α和微管蛋白β构成的α,β异二聚体是微管装配的基本单位，也是许多抗微管类药物的作用靶点。其中TUBB3编码的β-tubulin-Ⅲ（β-微管蛋白Ⅲ）与抗微管类药物的疗效关系最为密切，并被人们作为预测肿瘤对抗微管类药物化疗反应的标志物。TUBB3通常表达在神经，血管内皮细胞和其他组织，和其他微管蛋白一样用于构建微管。TUBB3在大量肿瘤组织中过表达包括非小细胞肺癌（NSCLC）、卵巢癌、乳腺癌、子宫颈癌、前列腺癌、胃癌、肠癌等等。

多种肿瘤细胞系的研究及大量临床试验结果均显示TUBB3mRNA的表达水平与抗微管类药物的疗效密切相关。低表达患者接受紫杉醇类或长春碱类化疗的效果较好，中位生存期较长；而TUBB3高表达的患者的抗微管类化疗疗效较差。一项对非小细胞肺癌患者的临床研究显示：TUBB3mRNA表达水平与含微管类化疗方案的疗效相关。TUBB3低表达患者无进展生存率和总生存率显著优于高表达患者。因此，检测TUBB3的表达水平对于肿瘤患者的治疗和预后有着重要意义。

实用新型内容

本实用新型要解决的技术问题是提供一种β-微管蛋白Ⅲ基因表达检测试剂盒，该试剂盒结构简单、设计合理、使用方便、制造容易、检测过程不易受污染；该试剂盒在检测β-微管蛋白Ⅲ基因表达时具有敏感性高、特异性强、耗时短等优点，并且该试剂盒在运输过程中，其内部的试剂容器不易左右晃动，从而保证了试剂容器的安全。

为了解决上述技术问题，本实用新型一种β-微管蛋白Ⅲ基因表达检测试剂盒，包括盒体、盒盖、固定座、去离子水试剂瓶、扩增引物管、白蛋白内参引物管和SYBR premix Ex Taq(含ROX)管；所述固定座上设置有第一孔和第二孔，所述去离子水试剂瓶放置在第一孔内，所述第一孔包括比放置在内部的去离子水试剂瓶直径大的折痕线和沿径向设置的切口，所述第一孔的开口要小于放置在内部的去离子水试剂瓶的直径，所述第二孔的侧壁上设置有螺纹状的凹槽，所述扩增引物管、白蛋白内参引物管和SYBR premix Ex Taq(含ROX)管的外侧包裹有一橡胶套，所述橡胶套的外侧面设有与所述第二孔上的凹槽相对应的突起。

所述扩增引物为特异性扩增TUBB3引物，上游引物序列为5′-CAAGTTCTGGGAAGTCATCAGTGA-3′；下游引物序列为5′-CCGAGTCGCCCACGTAGTT-3′；所述白蛋白内参引物上游引物序列为5′-TTCTACAATGAGCTGCGTGTG-3′，下游引物序列为：5′-CAGCCTGGATAGCAACGTACA-3′。引物包括扩增引物和白蛋白内参引物，引物浓度为100pmol/L。

本实用新型与现有产品相比，具有如下积极有益的效果：

本试剂盒结构简单、设计合理、使用方便、制造容易、检测过程不易受污染；本试剂盒在检测β-微管蛋白Ⅲ基因表达时具有敏感性高、特异性强、耗时短等优点，并且本试剂盒在运输过程中，其内部的试剂容器不易左右晃动，从而保证了试剂容器的安全。

附图说明

图1为本实用新型的结构示意图。

图2为本实用新型的固定座的俯视图。

图3为本实用新型的橡胶套的主视图。

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本实用新型进行进一步说明。

表1为本实用新型PCR反应体系。