[发明专利]作为体内造血刺激剂的TAT‑HOXB4H重组蛋白质的制备方法有效
申请号: | 201410854099.1 | 申请日: | 2008-05-27 |
公开(公告)号: | CN104650210B | 公开(公告)日: | 2018-01-23 |
发明(设计)人: | 吴国瑞;黄济鸿 | 申请(专利权)人: | 台湾尖端先进生技医药股份有限公司 |
主分类号: | C07K14/47 | 分类号: | C07K14/47;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16;A61K38/17;A61P7/00;A61P35/00;A61P35/02;A61P35/04;A61P37/00;A61P7/06 |
代理公司: | 北京中博世达专利商标代理有限公司11274 | 代理人: | 申健 |
地址: | 中国台湾新北市汐*** | 国省代码: | 台湾;71 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 作为 体内 造血 刺激剂 tat hoxb4h 重组 蛋白质 制备 方法 | ||
1.一种TAT-HOXB4H重组蛋白质的制备方法,其特征在于:所述方法包含在大肠杆菌宿主表现后,以下述之方法进行TAT-HOXB4H重组蛋白质的纯化:(i)将表现该蛋白质的不纯溶液通入一HisTrap管柱;(ii)冲洗该HisTrap管柱;(iii)将该部分纯化的蛋白质由该HisTrap管柱溶离出,而形成一部分纯化的蛋白质溶液;(iv)将该部分纯化的蛋白质溶液通入一MonoSP管柱;(v)冲洗该MonoSP管柱;(vi)将纯化的蛋白质,呈变性形式,由该MonoSP管柱溶离出;并利用疏水性化合物将溶离出的变性蛋白质以下列步骤再折迭:(i)将该溶离出的变性蛋白质与一疏水性化合物溶液混合形成一蛋白质与疏水性化合物溶液;(ii)将该蛋白质与疏水性化合物溶液去盐而得一蛋白质与疏水性化合物去盐溶液;(iii)利用超过滤制程将该疏水性化合物由该蛋白质与疏水性化合物去盐溶液中移除;并且该蛋白质于纯化后储存在IMDM培养基或DMEM培养基中,以提高纯化蛋白质之安定性。
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