[发明专利]一种依托咪酯有关物质的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及测定药物有关物质的技术领域，特别涉及一种依托咪酯有关物质的测定方法。

背景技术

依托咪酯是一种催眠性静脉全麻药，属于咪唑类衍生物，是咪唑的羟化盐，分子式为C₁₄H₁₆N₂O₂，分子量为244.29，安全性大，是麻醉诱导常用的药物之一，依托咪酯的临床应用已有30年的历史。

依托咪酯常采用制剂的形式，例如依托咪酯注射液，依托咪酯在注射液中容易降解产生杂质(有关物质)依托咪酸，在2010版中国药典中记载了依托咪酯有关物质的测定方法，其采用了高效液相色谱法，其中依托咪酸的校正因子为1.59，依托咪酸出峰早，基本与溶剂峰重合，因此无法测定依托咪酯中的有关物质依托咪酸。

发明内容

为了解决现有技术中存在的上述缺陷，本发明提供一种依托咪酯有关物质的测定方法，采用该方法可以很好地将依托咪酯中的有关物质依托咪酸峰和溶剂峰分开，进而可以获得依托咪酸的含量。

本发明实施例首先提供一种依托咪酯有关物质的测定方法，所述方法采用高效液相色谱法进行测定，所述高效液相色谱法的色谱条件包括：

色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂；

流动相为磷酸盐缓冲液和乙腈的混合溶液，其中，磷酸盐缓冲液的pH值为7.8～8.2，磷酸盐缓冲液和乙腈的体积比为50：50～90：10；

检测波长为235nm，流速为1.0ml/min，柱温为29℃～31℃。

在本发明技术方案中，对高效液相色谱条件进行优化，使得在色谱中的依托咪酸峰和溶剂峰达到了较好的分离，并且依托咪酸峰也与其它杂质峰和主峰可以较好地分离，进而可以通过计算依托咪酸的峰面积来得到依托咪酯中依托咪酸的含量。

在本发明技术方案中，不对依托咪酯的形式进行限定，只要依托咪酯符合色谱条件的依托咪酯原料和制剂都可以使用，依托咪酯制剂可以为依托咪酯注射液、依托咪酯脂肪乳注射液。

优选的，所述方法包括：

取依托咪酯脂原料或制剂采用25％的乙腈水溶液稀释为含依托咪酯0.5mg/ml的溶液，作为供试品溶液；

取所述供试品溶液采用30％的乙腈水溶液稀释，作为对照溶液；

取依托咪酸、美托咪酯和依托咪酯采用30％的乙腈水溶液稀释为含0.02mg/ml的依托咪酸、0.02mg/ml的美托咪酯和0.02mg/ml的依托咪酯的混合溶液，作为系统适用性试验溶液；

采用高效液相色谱法分别对所述系统适用性试验溶液、对照溶液和供试品溶液进行测定，记录色谱图，所述高效液相色谱法的色谱条件包括：

色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂；

流动相为磷酸盐缓冲液和乙腈的混合溶液，其中，磷酸盐缓冲液的pH值为7.8～8.2，磷酸盐缓冲液和乙腈的体积比为50：50～90：10；

按照梯度洗脱，检测波长为235nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃。

优选的，所述依托咪酯制剂为依托咪酯脂肪乳注射液。由于依托咪酯常以依托咪酯脂肪乳注射液的形式存在，并且在依托咪酯脂肪乳注射液中依托咪酯易降解生成依托咪酸杂质，因此，本发明的依托咪酯有关物质的测定方法特别适合应用于依托咪酯脂肪乳注射液有关物质的测定中。

优选的，所述方法包括：

取依托咪酯脂肪乳注射液5ml置于10ml量瓶中于冰浴中放置5分钟，加入冰浴过的乙腈稀释至刻度，剧烈振摇，先用滤纸过滤再用0.45μm的滤膜过滤，取续滤液5ml加水5ml摇匀，作为供试品溶液；

精密量取1ml供试品溶液置于100ml量瓶中，用30％的乙腈水溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；

取依托咪酸、美托咪酯和依托咪酯，加30％的乙腈水溶液溶解并稀释成含0.02mg/ml的依托咪酸、0.02mg/ml的美托咪酯和0.02mg/ml的依托咪酯的混合溶液，作为系统适用性试验溶液；