[发明专利]一种注射用多烯磷脂酰胆碱的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于制药工程技术领域，具体地说，涉及一种注射用多烯磷脂酰胆碱的制备方法。

背景技术

多烯磷脂酰胆碱系从大豆中提取得到的以磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine简称PC)为主要成分的混合物，临床主要用于肝胆疾病的辅助治疗，是疗效肯定的保肝药物，适应症为各种类型的肝病，如肝炎、慢性肝炎、肝坏死、肝硬化、肝昏迷(包括前驱肝昏迷)；脂肪肝(也见于糖尿病人)；胆汁阻塞、中毒、预防胆结石复发；手术前后的治疗，尤其是肝胆手术；妊娠中毒，包括呕吐；银屑病；神经性皮炎、放射综合征。多烯磷脂酰胆碱制备技术较为复杂，我国由于生产技术等原因，研究及生产未能得到有力的发展。多烯磷脂酰胆碱作为保肝药物的原料药，其质量标准包括产品的纯度、杂质限度、氧化指标等，另外甲氧基苯胺值是过氧化物的再次氧化产物指标，在制剂中有严格控制。现有生产技术对起始原料大豆磷脂的新鲜程度要求较高，放置时间较长的原料往往难以生产出氧化指标符合要求的产品。同时多烯磷脂酰胆碱纯度及杂质控制也是我国现有技术难以克服的难题，制约了多烯磷脂酰胆碱相关制剂开发，导致在国内制药领域发展缓慢。

目前纯化磷脂酰胆碱的方法包括CO₂超临界萃取法、膜分离法、金属盐沉淀法、吸附法、柱层析法、溶剂提取法等工艺方法。

金属盐沉淀法存在络合物解析金属离子过程繁琐、容易造成污染等缺陷，导致实际应用率低。CO₂超临界萃取法只适合制备混合磷脂，所得产品磷脂酰胆碱含量普遍偏低。磷脂酰胆碱与其他磷脂的分子量较接近，膜分离法要得到单一磷脂酰胆碱仍存在困难，其产品含量偏低不能满足注射用辅料要求。溶剂提取法是通过磷脂酰胆碱在两相溶剂中的溶解度的差异达到富集纯化的目的，对理化性质非常相似的各类磷脂杂质的选择性较差。

吸附法是一种较常用的纯化方法，通过选择不同理化特性的吸附剂对待吸附原料液进行搅拌吸附，达到纯化的效果，常见的吸附剂有:三氧化二铝、硅胶等，该方法只对磷脂酰乙醇胺(PE)、酸值等指标有一定的吸附效果，很难保证含量、溶血磷脂酰胆碱(LPC)等关键指标符合注射用标准。

硅胶柱层析法是另一种较常用的分离纯化方法，固定相与待分离物质的比例、洗脱溶剂种类和比例对柱层析的分离效果与除杂能力有巨大的影响，柱层析方法的溶剂及比例选择与产品本身的性质以及杂质性质有关，该方法虽常见，但能够使产品质量在满足注射用质量标准要求的同时又能符合商业化大生产的方法未见报道。

采用柱层析纯化磷脂酰胆碱的专利较多，其中日本专利JP52083912A、JP52057212A公开以硅胶柱层析，以三氯甲烷-乙醇或三氯甲烷-甲醇为洗脱剂，得到磷脂酰胆碱含量分别为80％、89％的产品，上述两篇专利产品的含量均低于98％，不能满足注射用要求。

中国专利CN103073572A公开了一种经过180℃高温热化，丙酮脱油，离心，硅胶吸附过滤等步骤，得到过氧化值0.84、酸值9.06、磷脂酰胆碱含量为88.6％-92.1％的产品，该专利技术高温处理磷脂会导致醛酮类氧化物质(甲氧基苯胺值)的产生，且所得产品纯度、酸值、脂肪酸等指标均不能符合注射用标准要求。

中国专利CN100500676C公开了以大豆粉末磷脂为原料经过提取，一次氧化铝层析一次硅胶层析，低碳醇-水洗脱，得到酸值8.7、磷脂酰胆碱含量为93.4％的产品，该方法所得产品磷脂酰胆碱含量偏低，酸值偏高，甘油三酯、脂肪酸、甲氧基苯胺值等指标无法有效控制。

中国专利CN102633832A公开了一种以硅胶柱层析，以醇-水洗脱得到含有磷脂酰胆碱含量分别为90％-97.5％的产品方法，该专利方法均无法做到在纯化含量的同时控制甘油三酯、游离脂肪酸以及氧化指标等符合注射用原料要求。

以上报道磷脂酰胆碱柱层析法专利技术方法对产品杂质限度、甘油三酯、脂肪酸以及过氧化值、甲氧基苯胺值等关键指标均没法控制，难以将上述技术方法应用于注射用原料领域。目前开发注射用磷脂酰胆碱的技术领域里，没有专门针对控制过氧化值、甲氧基苯胺值等理化指标的方法，磷脂酰胆碱本身具有高不稳定性，开发该类产品需要过度依赖于起始原料的新鲜度，受技术约束，国内注射用多烯磷脂酰胆碱主要依赖进口，导致多烯磷脂酰胆碱价格昂贵，供货周期长，不利用多烯磷脂酰胆碱制剂在市场上的开发与普及。