[发明专利]一种注射用蛋黄磷脂酰胆碱的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于制药工程技术领域，具体地说，涉及一种注射用蛋黄磷脂酰胆碱的制备方法。

背景技术

磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine简称PC)又称为卵磷脂，结构上是由胆碱与磷脂酸两部分组成的一类磷脂化合物。磷脂酰胆碱是生物体的重要组分，作为天然的乳化剂及营养补充剂，在食品、化工、医药中应用广泛。在药品领域中主要用作增溶剂、乳化剂、油脂类的抗氧化剂等，是新型靶向制剂如脂质体和脂微球等制剂的重要辅料。临床上，磷脂酰胆碱可作为低水溶性药物的载体，能提高药物的生物利用度，降低药物毒性。注射用磷脂酰胆碱作为新型脂质体、脂微球制剂的关键辅料，其质量标准包括产品的纯度、杂质限度、氧化指标等，另外甲氧基苯胺值是过氧化物的再次氧化产物指标，在制剂中有严格控制，因此开发注射用磷脂酰胆碱需要严格控制上述关键指标。

目前纯化磷脂酰胆碱的方法包括CO₂超临界萃取法、膜分离法、金属盐沉淀法、吸附法、柱层析法、溶剂提取法等工艺方法。

金属盐沉淀法存在络合物解析金属离子过程繁琐、容易造成污染等缺陷，导致实际应用率低。CO₂超临界萃取法只适合制备混合磷脂，所得产品磷脂酰胆碱含量普遍偏低。磷脂酰胆碱与其他磷脂的分子量较接近，膜分离法要得到单一磷脂酰胆碱仍存在困难，其产品含量偏低不能满足注射用辅料要求。溶剂提取法是通过磷脂酰胆碱在两相溶剂中的溶解度的差异达到富集纯化的目的，对理化性质非常相似的各类磷脂杂质的选择性较差。

吸附法是一种较常用的纯化方法，通过选择不同理化特性的吸附剂对待吸附原料液进行搅拌吸附，达到纯化的效果，常见的吸附剂有：三氧化二铝、硅胶等，该方法只对磷脂酰乙醇胺(PE)、酸值等指标有一定的吸附效果，很难保证含量、溶血磷脂酰胆碱(LPC)以及胆固醇等关键指标符合注射用标准。

硅胶柱层析法是另一种较常用的分离纯化方法，固定相与待分离物质的比例、洗脱溶剂种类和比例对柱层析的分离效果与除杂能力有显著的影响，柱层析方法的溶剂及比例选择与产品本身的性质以及杂质性质有关，该方法虽常见，但能够使产品质量在满足注射用质量标准要求的同时又能符合商业化大生产的方法未见文献报道。

采用柱层析纯化磷脂酰胆碱的专利较多，其中日本专利JP52083912A、JP52057212A公开以硅胶柱层析，以三氯甲烷-乙醇或三氯甲烷-甲醇为洗脱剂，得到磷脂酰胆碱含量分别为80％、89％的产品，上述两篇专利产品的含量均低于98％，不能满足注射用要求。

中国专利CN103073572A公开了一种经过180℃高温热化，丙酮脱油，离心，硅胶吸附过滤等步骤，得到过氧化值0.84、酸值9.06、磷脂酰胆碱含量为88.6％-92.1％的产品，该专利技术高温处理磷脂会导致醛酮类氧化物质(甲氧基苯胺值)的产生，且所得产品纯度、酸值、脂肪酸等指标均不能符合注射用标准要求。

中国专利CN100500676C公开了以大豆粉末磷脂为原料经过提取，一次氧化铝层析一次硅胶层析，低碳醇-水洗脱，得到酸值8.7、磷脂酰胆碱含量为93.4％的产品，该方法所得产品磷脂酰胆碱含量偏低，酸值、甘油三酯、脂肪酸、甲氧基苯胺值等指标无法有效控制。

中国专利CN102633832A公开了一种以硅胶柱层析，以醇水洗脱得到含有磷脂酰胆碱含量分别为90％-97.5％的产品方法，该专利方法均无法做到在纯化提高含量的同时控制甘油三酯等杂质指标和过氧化值等氧化指标，使产品质量符合注射用辅料要求。

以上报道磷脂酰胆碱柱层析专利技术方法在甘油三酯、胆固醇、脂肪酸等杂质限度和酸值、过氧化值、甲氧基苯胺值等氧化指标方面均没法控制，难以将上述技术方法应用于注射用药用辅料领域。目前开发注射用磷脂酰胆碱的技术领域里，没有专门针对控制过氧化值、甲氧基苯胺值等理化指标的方法，磷脂酰胆碱本身具有高不稳定性，开发该类产品需要过度依赖于起始原料的新鲜度；受技术约束，目前国内注射用蛋黄磷脂酰胆碱主要依赖进口，且价格昂贵，供货周期长，导致磷脂酰胆碱相关产品开发周期长、成本高，不利于市场的普及。

因此，开发以蛋黄卵磷脂为原料，通过柱层析并对三元混合溶剂比例进行控制，经过两次洗脱，即可以提高产品含量又可以降低胆固醇、甘油三酯、游离脂肪酸、酸值、过氧化值、甲氧基苯胺值等关键指标，使蛋黄磷脂酰胆碱符合注射用辅料标准的方法，对开发新型靶向制剂极具意义。

发明内容