[发明专利]一种胰岛素样生长因子结合蛋白7真核表达质粒及其构建方法和应用在审
| 申请号: | 201410829801.9 | 申请日: | 2014-12-26 |
| 公开(公告)号: | CN104789591A | 公开(公告)日: | 2015-07-22 |
| 发明(设计)人: | 彭健;岳春燕;胥洪鹃;廖明媚;杨满意 | 申请(专利权)人: | 中南大学湘雅医院 |
| 主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/12;A61K48/00;A61K38/17;A61P35/00 |
| 代理公司: | 长沙正奇专利事务所有限责任公司 43113 | 代理人: | 马强;周栋 |
| 地址: | 410078 湖*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 胰岛素 生长因子 结合 蛋白 表达 质粒 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种胰岛素样生长因子结合蛋白7真核表达质粒,其特征在于,所述胰岛素样生长因子结合蛋白7真核表达质粒序列如SEQ ID NO.2所示,命名为pIRES2-ZsGreen1-IGFBP7真核表达质粒。
2.如权利要求1所述真核表达质粒的构建方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
(1)提取HepG2贴壁细胞RNA作为模板,以SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的序列为引物,构建pMD19-T-IGFBP7质粒,所述pMD19-T-IGFBP7质粒序列如SEQ ID NO.1所示;
(2)在pMD19-T-IGFBP7质粒中加入酶切位点,酶切位点为BglII-IGFBP7-EcoRI,以加入了酶切位点的pMD19-T-IGFBP7质粒为模版,以SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的序列为引物扩增IGFBP7编码区,然后将该编码区克隆至pIRES2-ZsGreen1质粒,构建成pIRES2-ZsGreen1-IGFBP7真核表达质粒。
3.如权利要求1所述真核表达质粒在制备抑制细胞增殖试剂中的应用。
4.如权利要求1所述真核表达质粒在制备抑制细胞侵袭试剂中的应用。
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