[发明专利]一种用于分离原代呼吸道上皮细胞的双材质中空套管有效
申请号: | 201410823161.0 | 申请日: | 2014-12-24 |
公开(公告)号: | CN104473664A | 公开(公告)日: | 2015-04-01 |
发明(设计)人: | 李煜生;任杰 | 申请(专利权)人: | 南方医科大学 |
主分类号: | A61B10/02 | 分类号: | A61B10/02 |
代理公司: | 北京市诚辉律师事务所 11430 | 代理人: | 朗坚 |
地址: | 510510 广东省广州*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 分离 呼吸道 上皮细胞 材质 中空 套管 | ||
技术领域
本发明涉及医学仪器领域,具体而言,涉及一种用于分离原代呼吸道上皮细胞的双材质中空套管。
背景技术
呼吸道上皮细胞是呼吸系统与外界接触的第一道天然屏障,其结构与功能稳态是呼吸系统维持正常换气功能和防御功能的细胞基础。呼吸道上皮细胞附着于基底膜生长,共同构成呼吸道的假复层柱状纤毛上皮,其表面的纤毛有节律地向咽部摆动,在机体排除呼吸道刺激性异物的过程中发挥了重要作用。
实验动物的原代呼吸道上皮细胞作为人呼吸道上皮细胞的实验模型,对于临床和实验室工作具有不可取代的借鉴作用。呼吸道上皮细胞分离培养技术的不断完善必将对以呼吸系统研究为基础的病毒学、病理学和毒理学、生物化学、药代动力学、发育生物学,甚至临床治疗与应用产生推动作用。
目前,国内外分离实验用动物大气道原代呼吸道上皮细胞大多采用纵向剪开气管,直接浸入含链酶蛋白酶的试管中,4℃酶解18-24小时,再离心酶解液(离心力123g),最后收集细胞团的方法来获取原代呼吸道上皮细胞。然而,这种方法获取的细胞数较少、活性较差,最为重要的是杂细胞过多,对呼吸道疾病的细胞学研究产生限制。因此,我们总结实验中的经验,开发出基于气管插管的分离大气道上皮细胞的方法。但是,在该方法的操作过程中存在以下问题:若选用的材质强度太大而弹性小,导致针头插入欠紧,且折返、动脉夹夹持困难,容易造成链霉蛋白酶外漏;若选取的材质强度小而弹性大,又将导致手术线结扎时,不宜扎紧,也会造成链霉蛋白酶外漏等。目前虽已有多种气管插管方法应用于动物体外实验中,但这些方法不但技术操作复杂且需要特殊设备,而且往往因链霉蛋白酶外漏导致细胞消化不充分,从而影响整个实验的成败。于是我们针对上述问题开发出双材质中空套管。此套管选取两种不同特性、材质的中空管组成套管,分别满足两端不同需要,以达到防止链霉蛋白酶外漏并有效减少链霉蛋白酶用量的效果,从而减少酶解液对游离呼吸道上皮细胞的损伤作用,在保证分离的呼吸道上皮细胞活性的基础上,大幅增加细胞分离数量。本发明通过运用铁氟龙中空管、GA-1073硅胶管和文锦超能380硅胶胶水实现这一构想。
GA-1073硅胶管强度大(硬度70±5D),且生物相容性较好。铁氟龙管,又叫聚四氟乙烯(Polytetrafluoroethene,PTFE)管,是采用PTFE材料制成,具有强度小(硬度50-55D)、韧性大的特点,可塑性强。文锦超能380硅胶胶水化学成份为氰基丙烯酸酯,目前医用氰基丙烯酸酯粘合剂已在创伤骨科中广泛应用,无生物毒性。本套管即利用GA-1073硅胶管强度大不易变形,即在手术线结扎时不易坍陷的特点,通过选取适当管径的GA-1073硅胶管,在减少对气管损伤的同时,更便于插入动物气管,手术线结扎紧密;又利用铁氟龙中空管强度小和韧性大的特点,既便于连接注射器,又在后期动脉夹封闭管腔时便于折返。文锦超能380硅胶胶水是以高分子聚合物为主体的溶剂型产品,粘接强度高、抗剪切。此双材质中空套管不仅可以重复使用,而且在保证分离的呼吸道上皮细胞活性的基础上,大幅增加细胞分离数量。
目前,市售的原代呼吸道上皮细胞价格昂贵,且多数都已丧失纤毛定向摆动的在体生理功能,活性较差。因此,需要更为便利且快捷的呼吸道上皮细胞分离设备。
发明内容
本发明涉及一种便于进行原代呼吸道上皮细胞分离的双材质中空套管。所述双材质套管能够保证实验动物气管插管的成功率,并且确保由注射器、双材质中空套管和气管所组成的管道系统的通畅性和密闭性,防止此管道系统在培养基中浸泡、酶解的过程中出现酶解液渗漏,在保证链霉蛋白酶与呼吸道上皮细胞的接触和作用的同时,有效减少链霉蛋白酶的用量,从而降低酶解液对游离呼吸道上皮细胞的损伤。以获取更多数目且活性更好的原代呼吸道上皮细胞。
所述的双材质中空套管由,
(1)管径细、强度高的硅胶管构成的插入气管的内层套管,和
(2)管径粗、韧性大、可对折并通过止血钳封闭的铁氟龙中空管构成的外层套管套接而成;
并且硅胶管的外径等于铁氟龙中空管的内径。
所述的套接为通过可用于外科手术的医用粘合剂粘合,所述的医用粘合剂优选为文锦超能380硅胶粘硅胶胶水。
所述的硅胶管优选为GA-1073硅胶管,强度大不易变形,在手术线结扎时不易坍陷,通过选取适当管径的GA-1073硅胶管,在减少对气管损伤的同时,能更便于插入动物气管,且手术线结扎时不塌陷从而保证了链霉蛋白酶消化液的顺利流入气管腔;
所述的铁氟龙中空管强度小韧性大的,既便于连接注射器,又在后期封闭管腔时便于折叠并通过止血钳夹紧密封。
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