[发明专利]一种高分子γ-聚谷氨酸的制备方法及一种剃须泡沫

权利要求书

1.一种高分子γ-聚谷氨酸的制备方法，包括地衣芽胞杆菌发酵罐发酵和γ-聚谷氨酸的提取；

其特征在于，所述地衣芽胞杆菌菌株具体为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)CGMCC NO.3336；该菌株已于2009年10月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.3336；

所述发酵罐发酵：将种子液以5-10％的接种量接种于发酵罐，30L发酵罐发酵培养基装量为15L，初始发酵温度38-40℃，罐压0.01-0.05Mpa，通风量0.5-1.0vvm，转速400-600rpm；当发酵液OD₆₆₀在0.550-0.600时，控制发酵温度30-35℃，调节转速至200-350rpm，通风量1.5-2.0vvm，发酵总时间为72h，期间控制pH在7.2-7.5，直至发酵结束前2-6小时；

所述发酵培养基组分为：葡萄糖80g/L，氯化钠10g/L，MgSO₄·7H₂O 1g/L，无水氯化钙1g/L，FeSO₄·7H₂O 0.02g/L，KCl 0.5g/L，精氨酸0.8g/L，组氨酸0.5g/L，苏氨酸0.5g/L，甲硫氨酸0.4g/L，谷氨酰胺0.5g/L，胆碱0.31g/L，吡哆醇0.001g/L，不足部分纯净水补足；

所述γ-聚谷氨酸的提取：发酵结束后离心去菌体，然后用上清液5倍体积的乙醇，醇沉析出γ-聚谷氨酸，再复溶于上清液同体积的蒸馏水，利用喷雾干燥方法制备出干粉γ-聚谷氨酸。

2.根据权利要求1所述高分子γ-聚谷氨酸的制备方法，其特征在于，所述地衣芽胞杆菌接种于发酵罐之前，菌种活化和种子液的制备具体如下：

菌种活化：将地衣芽孢杆菌CGMCC NO.3336原始菌株接种在斜面培养基上，于37℃培养16小时，如此活化2-3次，制备成熟的斜面种子；

种子液的制备：将一环活化后的斜面种子接种于装有50ml种子培养基的500ml三角瓶中，37℃，220rpm培养16小时至对数生长期；

所述种子培养基组成为：葡萄糖30g/L，酵母膏7g/L，胰蛋白胨10g/L，K₂HPO₄0.5g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5g/L，pH7.2，不足部分纯净水补足。

3.根据权利要求1或2所述高分子γ-聚谷氨酸的制备方法，所述发酵罐发酵步骤如下：

将种子液以10％的接种量接种于发酵罐，30L发酵罐发酵培养基装液量为15L，初始发酵温度38℃，罐压0.03Mpa，通风量0.8vvm，转速500rpm；当发酵液OD₆₆₀在0.550-0.600时，控制发酵温度32℃，调节转速至250rpm，通风量2.0vvm，发酵总时间为72h，期间控制pH在7.3，直至发酵结束前2小时。

4.根据权利要求1或2所述高分子γ-聚谷氨酸的制备方法，所述发酵罐发酵步骤如下：

将种子液以5％的接种量接种于发酵罐，30L发酵罐发酵培养基装液量为15L，初始发酵温度40℃，罐压0.01Mpa，通风量0.5vvm，转速400rpm；当发酵液OD₆₆₀在0.550-0.600时，控制发酵温度30℃，调节转速至200rpm，通风量1.5vvm，发酵总时间为72h，期间控制pH在7.2，直至发酵结束前6小时。

5.根据权利要求1或2所述高分子γ-聚谷氨酸的制备方法，所述发酵罐发酵步骤如下：

将种子液以7％的接种量接种于发酵罐，30L发酵罐发酵培养基装液量为15L，初始发酵温度40℃，罐压0.05Mpa，通风量1.0vvm，转速600rpm；当发酵液OD₆₆₀在0.550-0.600时，控制发酵温度35℃，调节转速至350rpm，通风量2.0vvm，发酵总时间为72h，期间控制pH在7.5，直至发酵结束前4小时。