[发明专利]一种降低人POKEMON基因表达的siRNA及其相关应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体地说涉及RNA干扰技术，更具体地涉及一种降低人POKEMON基因表达的小分子干扰核糖核酸(siRNA)。

背景技术

RNA干扰技术是一种新兴的基因治疗技术，又称为基因敲低(knock-down)或基因沉默(gene silencing)，其中siRNA(small interfering RNA)是最关键的效应分子，其具有21-23nt碱基的短片段双链RNA分子，能够以序列特异性地结合靶mRNA并使mRNA降解。能有效、特异地抑制细胞内基因的表达。由于RNA干扰具有高效、特异性，siRNA介导的转录后基因沉默是针对靶向基因的外显子序列，对其启动子或内含子序列却没有效应，是一种转录后基因表达调控机制，且不诱导非特异性的干扰素激活途径，因而成为继反义核普酸、核酶技术之后一种新的分析功能缺失表型的工具，为基因功能研究和基因治疗开辟了新的道路，目前已广泛用于抑制特定基因的表达研究，特别是靶向恶性肿瘤中高度表达基因的研究。

POKEMON是POK转录抑制因子家族成员之一，它包括一个氨基末端POZ/BTB结构域和羧基端Krüppel型锌手指结构域，是T淋巴细胞、B淋巴细胞和红细胞系发育和成熟的重要因子。研究结果显示，POKEMON的作用位于许多肿瘤抑制基因和原癌基因的上游，通过ARF-HDM2-p53和Rb-E2F路径对肿瘤发生发展进行调节，可使癌细胞获得抗老化和死亡的能力，因此被称为癌症的“总开关”。因此，将其作为靶基因将有助于肿瘤的根治。POKEMON基因在乳腺癌、肝癌和淋巴瘤等肿瘤的异常表达在癌基因转化和肿瘤的发生过程中发挥着重要的作用。重点是细胞内POKEMON基因的缺失不会对细胞的正常生长造成影响，这为设计低副作用的特异性抗癌药物提供了可能。目前尽管早期癌症患者进行了根治性切除和辅助治疗，但仍具有很大的复发和转移的风险。总体而言，约50％-60％的患者将最终发展为转移性或晚期疾病，5年生存率小于5％。

发明内容

本发明的目的在于提供4对针对人POKEMON基因DNA片段的siRNA，能高效的抑制人POKEMON基因表达的小干扰核糖核酸。

本发明首先提供了一种降低POKEMON基因表达的小分子干扰RNA(siRNA)，包括正义链和反义链，序列如下：

siRNA1正义链：5’-CCCACCACAAACGUAGAAUUU-3’

反义链：3’-UUGGGUGGUGUUUGCAUCUUA-5’

siRNA2正义链：5’-GACCUUAAAUGAUUUCUGUUU-3’

反义链：3’-UUCUGGAAUUUACUAAAGACA-5’

siRNA3正义链：5’-CUGACGUGAAGAGGUCUUAUU-3’

反义链：3’-UUGACUGCACUUCUCCAGAAU-5’

siRNA4正义链：5’-CUCUGUGACACACACAUCUUU-3’

反义链：3’-UUGAGACACUGUGUGUGUAGA-5’

本发明所述小分子干扰RNA(siRNA)针对的POKEMON基因的靶序列如SEQ ID No.1-4所示。

SEQ ID No.1：AA CCCACCACAAACGTAGAAT CC

SEQ ID No.2：AA GACCTTAAATGATTTCTGT CT

SEQ ID No.3：TT CTGACGTGAAGAGGTCTTA GC

SEQ ID No.4：TT CTCTGTGACACACACATCT TC