[发明专利]一种酶法提取硫酸软骨素的工艺

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种酶法提取硫酸软骨素的工艺。

背景技术

硫酸软骨素别名牛磺软骨素、康得宁等 , 是哺乳动物结缔组织的主要成分之一 ,多分布于软骨、鼻骨、喉骨、韧带、肌膜中。

在医学上主要的应用途径是作为治疗关节疾病的药品，与氨基葡萄糖配合使用，具有止痛，促进软骨再生的功效，可以从根本改善关节问题。

通过高科技深加工，可以治疗神经性头疼、三叉神经痛、冠心病、心绞痛、心肌缺氧、心脑血管疾病、关节痛、动脉粥样硬化及肝炎等症，其中CS 还具有抗凝和抗血栓形成的作用，也可用于因链霉素引起的听觉障碍和肝脏功能受损的辅助治疗以及高血脂的辅助治疗。

可以作为保健品、食品中的添加剂，具有增强人体体质及抗病菌、美容、抗衰老等作用。改善听力和肌肤干燥。在体内可抑制小肠对脂质和葡萄糖的吸收以达到减肥作用。

随着硫酸软骨素生物活性不断被揭示和其应用领域的不断扩展 , 有关硫酸软骨素的提取、 纯化和分离技术已取得了一定的研究成果, 但应用于生产实际还有许多需要改进和完善之处 , 尤其是硫酸软骨素不同组分的分离技术还有待深入研究。

发明内容

为了提高硫酸软骨素的生产效率，本发明提供了一种酶法提取硫酸软骨素的工艺。

一种酶法提取硫酸软骨素的工艺，本发明包括下述生产工艺：

（1）将软骨粉碎后所得粉末加入一定量的氢氧化钠溶液获得提取液，料液比为1:7～9；

（2）将提取液pH调节到9.0～9.5，向提取液添加相当于软骨粉末质量4%的胰蛋白酶和胃蛋白酶，在40～50℃的温度下酶解5～6h获得精提取液；

（3）将精提取液pH调节到6.5～7.0，升高温度至80～90℃，向精提取液中添加活性炭和高岭土吸附提取液中的杂质，获得澄清液；

（4）过滤，取滤液，向滤液中加入乙醇溶液，使得乙醇体积分数达到60-70%，沉降1h ；

（5）将步骤（4）中的沉降液离心，取沉淀，抽滤,用乙醇洗涤1-2次, 置于恒温干燥箱中干燥，得到硫酸软骨素。

所述步骤（1）中氢氧化钠质量浓度为8～12%，提取温度为30～40℃，提取时间为12～15h。

所述步骤（2）中胰蛋白酶和胃蛋白酶的质量比为1:1。

所述步骤（4）中沉淀的时间为5～6h。

所述步骤（5）中，将沉降液离心的条件是，在6000rpm的转速下，离心10min；干燥温度为60℃。

在该条件下, 所得硫酸软骨素产品的最高产率为18.9～20.7% , 纯87.0～89.5 % , 达到国家标准。

具体实施方式

实施例1

一种酶法提取硫酸软骨素的工艺，本发明包括下述生产工艺：

（1）将软骨粉碎后所得粉末加入质量分数为8%的氢氧化钠溶液，料液比为1:7；

（2）将提取液pH调节到9.0，向提取液添加相当于软骨粉末质量4%的胰蛋白酶和胃蛋白酶，在40℃的温度下酶解5h获得精提取液；

（3）将精提取液pH调节到6.5，升高温度至80℃，向精提取液中添加活性炭和高岭土吸附提取液中的杂质，获得澄清液；

（4）过滤，取滤液，向滤液中加入乙醇溶液，使得乙醇体积分数达到60%，沉降1h ；

（5）将步骤（4）中的沉降液离心，取沉淀，抽滤,用乙醇洗涤1-2次, 置于恒温干燥箱中于60℃干燥，得到硫酸软骨素。

在该条件下, 所得硫酸软骨素产品的产率为19.3 % , 纯度为87.5 % , 达到国家标准。

实施例2

一种酶法提取硫酸软骨素的工艺，本发明包括下述生产工艺：

（1）将软骨粉碎后所得粉末加入质量分数为9%的氢氧化钠溶液，料液比为1:8；

（2）将提取液pH调节到9.4，向提取液添加相当于软骨粉末质量4%的胰蛋白酶和胃蛋白酶，在45℃的温度下酶解5h获得精提取液；

（3）将精提取液pH调节到6.8，升高温度至90℃，向精提取液中添加活性炭和高岭土吸附提取液中的杂质，获得澄清液；

（4）过滤，取滤液，向滤液中加入乙醇溶液，使得乙醇体积分数达到70%，沉降1h ；

（5）将步骤（4）中的沉降液离心，取沉淀，抽滤,用乙醇洗涤1-2次, 置于恒温干燥箱中于60℃干燥，得到硫酸软骨素。

在该条件下, 所得硫酸软骨素产品的产率为19.6 % , 纯度为88.3 % , 达到国家标准。