[发明专利]鸡γ干扰素表达基因改造方法、利用该方法改造得到的基因在审
| 申请号： | 201410811261.1 | 申请日： | 2014-12-22 |
| 公开（公告）号： | CN104404051A | 公开（公告）日： | 2015-03-11 |
| 发明（设计）人： | 侯伟宏;王甜;梁武;苏建东;杨保收 | 申请（专利权）人： | 天津瑞普生物技术股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/23 | 分类号： | C12N15/23;C12N15/70 |
| 代理公司： | 天津滨海科纬知识产权代理有限公司 12211 | 代理人： | 杨慧玲 |
| 地址： | 300308 天津市滨海新区空港*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 干扰素 表达 基因 改造 方法 利用 得到 | ||
1.一种鸡γ干扰素表达基因改造方法，其特征在于：在鸡γ干扰素天然表达基因的基础上以大肠杆菌非稀有密码子替换其中的大肠杆菌稀有密码子。
2.根据权利要求1所述的一种鸡γ干扰素表达基因改造方法，其特征在于：所述鸡γ干扰素表达基因所表达的蛋白质N端对应的核苷酸上连接有信号肽或利用表达载体上的信号肽。
3.根据权利要求1所述的一种鸡γ干扰素表达基因改造方法，其特征在于：所述鸡γ干扰素表达基因末端具有标签蛋白。
4.根据权利要求4所述的一种鸡γ干扰素表达基因改造方法，其特征在于所述标签蛋白为His标签、Arg标签、FLAG标签或GST标签的其中一种。
5.一种利用权利要求1所述方法改造得到的鸡γ干扰素表达基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO2所示。
6.一种利用权利要求5所述基因表达鸡γ干扰素方法，其特征在于包括以下步骤：将该基因插入表达载体中，而后将该重组表达载体导入大肠杆菌，以异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷为诱导物进行诱导表达，诱导浓度为0.1～1mmol/L，诱导温度为16～37℃，诱导表达时间为3～16小时。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述表达载体是pBV220、pET系列载体或pQE系列载体的任一种。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于所述表达载体是pET-28a(+)。
9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述大肠杆菌是大肠杆菌DH5α、大肠杆菌BL21(DE3)或大肠杆菌JM109。
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