[发明专利]一种Rh血型检测卡

说明书

技术领域

本发明涉及医学领域，尤其涉及一种Rh血型检测卡。

背景技术

Rh系统是一个极为复杂的血型系统，重要性仅次于ABO系统。其中D抗原是Rh 血型抗原系统中最重要的抗原，人红细胞膜上存在D抗原，即为RhD阳性，不存在D抗原，即为RhD阴性。除了D抗原之外，C、c、E、e抗原也是Rh系统中的主要抗原，具有较强的临床意义。另外，由于不规则抗体绝大多数属于Rh血型系统的抗体，在输入含有相应抗原的血液后，能引起严重的免疫性溶血性输血反应，且IgG性质的Rh系统的抗体通过胎盘能力强，从而破坏胎儿具有与抗体对应抗原的红细胞，引发严重的新生儿溶血病，因此进行准确的Rh分型对于减少免疫性溶血性输血反应、对新生儿溶血病进行诊断、预防和治疗具有重要的临床意义。

微柱凝胶免疫检测技术是20世纪90年代产生的一种免疫检测技术，其基本原理是利用分子筛技术，离心技术和特异性免疫反应技术原理，把血型血清学技术与凝胶分子筛技术有机结合起来，可灵敏地检测出可能存在的微弱血型抗原抗体反应，被认为是血型血清学检验的里程碑。

目前国内外已有一些厂家生产Rh血型检测卡，但是存在以下一些不足：一是采用单一型号的葡聚糖凝胶或聚丙烯葡聚糖凝胶，使得灵敏度与特异性无法兼顾；二是采用生理盐水或抗体缓冲液溶胀凝胶，使得凝胶无法充分完全溶胀，以及破坏反应体系的离子强度；三是对添加不同抗体的凝胶，凝胶洗涤缓冲液完全一致，无法有效保护抗体稳定性。

发明内容

本发明就是要克服以上不足，提供一种灵敏度高、特异型好、稳定性强、保质期长的Rh血型检测卡。

为达到上述目的，本发明通过以下技术方案进行解决：

一种Rh血型检测卡包括含有六个微柱的检测卡，所述六个微柱内分别装有等量的抗D凝胶、抗C凝胶、抗c凝胶、抗E凝胶、抗e凝胶和空白凝胶，其通过以下方法制备而成：

（1）葡聚糖凝胶的溶胀：选用至少两种交联葡聚糖凝胶进行混合，然后加入纯化水中进行充分悬浮溶胀，再用纯化水洗涤去除破碎颗粒，得到大小均匀、呈完整球形的葡聚糖凝胶颗粒；

（2）制备各抗体稀释液：

抗D稀释液：以磷酸盐缓冲液（PBS）为基液，其中含有乙二胺四乙酸二钾盐（EDTA二钾盐）10-15g/L、牛血清白蛋白35-40g/L，稀释液的pH值为6.6-6.8；

抗C稀释液：以生理盐水为基液，其中含有乙二胺四乙酸二钾盐15-20g/L、牛血清白蛋白25-28g/L，pH值为6.6-6.8；

抗c稀释液：以生理盐水为基液，其中含有乙二胺四乙酸二钾盐12-18g/L、牛血清白蛋白40-45g/L，pH值为6.6-6.8；

抗E稀释液：以磷酸盐缓冲液为基液，其中含有乙二胺四乙酸二钾盐15-25g/L、牛血清白蛋白20-25g/L，pH值为6.6-6.8；

抗e稀释液：以磷酸盐缓冲液为基液，其中含有乙二胺四乙酸二钾盐10-15g/L、牛血清白蛋白25-35g/L，pH值为6.6-6.8；

空白凝胶洗涤缓冲液：以纯化水为溶剂，缓冲液中含有氯化钠1.75-2.07g/L、磷酸氢二钠0.185-0.219g/L、磷酸二氢钠0.203-0.24g/L、甘氨酸18-21g/L；并调节 pH值为6.6-6.8；

（3）制备各抗体工作液：

取抗D单克隆抗体浓缩液与抗D稀释液进行混合，使得到的抗D单克隆抗体工作液的效价≥64；

取抗C单克隆抗体浓缩液与抗C稀释液混合，使得到的抗C单克隆抗体工作液的效价≥16；

取抗c单克隆抗体浓缩液与抗c稀释液混合，使得到的抗c单克隆抗体工作液的效价≥16；

取抗E单克隆抗体浓缩液与抗E稀释液混合，使得到的抗E单克隆抗体工作液的效价≥16；

取抗e单克隆抗体浓缩液与抗e稀释液混合，使得到的抗e单克隆抗体工作液的效价≥16；

（4）凝胶洗涤：

取等量的葡聚糖凝胶颗粒分别用等量的抗D稀释液、抗C稀释液、抗c稀释液、抗E稀释液、抗e稀释液和空白凝胶洗涤缓冲液进行洗涤至少三次，再加入相对应的抗D单克隆抗体工作液、抗C单克隆抗体工作液、抗c单克隆抗体工作液、抗E单克隆抗体工作、抗e单克隆抗体工作液和空白凝胶洗涤缓冲液进行混合，得到抗D凝胶、抗C凝胶、抗c凝胶、抗E凝胶、抗e凝胶和空白凝胶；

（5）分装：