[发明专利]改良型腈水合酶有效
| 申请号: | 201410797555.3 | 申请日: | 2012-06-07 |
| 公开(公告)号: | CN104531654B | 公开(公告)日: | 2018-06-12 |
| 发明(设计)人: | 渡边文昭;原爱;安保贵永;北原彩 | 申请(专利权)人: | 三菱化学株式会社 |
| 主分类号: | C12N9/88 | 分类号: | C12N9/88;C12N15/60;C12P13/02 |
| 代理公司: | 北京林达刘知识产权代理事务所(普通合伙) 11277 | 代理人: | 刘新宇;李茂家 |
| 地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 腈水合酶 改良型 培养物 重组载体 转化体 谷氨酸 氨基酸序列 酰胺化合物 半胱氨酸 催化活性 谷氨酰胺 甲硫氨酸 天冬氨酸 天冬酰胺 异亮氨酸 处理物 脯氨酸 赖氨酸 丝氨酸 苏氨酸 组氨酸 氨基酸 制造 自由 | ||
1.一种改良型腈水合酶,其选自下述中的至少一种:
(a1)一种改良型腈水合酶,其特征在于,其为由序列号4及序列号2的氨基酸组成的腈水合酶,α亚基由序列号4所示的氨基酸序列组成,β亚基由序列号2所示的氨基酸序列从N末端开始数第37位的氨基酸为选自由丙氨酸、缬氨酸、天冬氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸和甲硫氨酸所组成的组的氨基酸序列组成;
(a2)一种改良型腈水合酶,其特征在于,α亚基由序列号4所示的氨基酸序列组成,β亚基由序列号2所示的氨基酸序列的从N末端开始数第17位的脯氨酸变为甘氨酸、第57位的丝氨酸变为甲硫氨酸,第107位的酪氨酸变为赖氨酸、114位的赖氨酸变为酪氨酸、167位的天冬酰胺变为丝氨酸,第219位的缬氨酸变为丙氨酸,序列号2的从N末端开始数第37位的亮氨酸被丙氨酸或天冬氨酸置换的氨基酸序列组成;
(b1)一种改良型腈水合酶,其特征在于,其为由序列号4及序列号2的氨基酸组成的腈水合酶,α亚基由序列号4所示的氨基酸序列组成,β亚基由序列号4所示的氨基酸序列从N末端开始数第83位的氨基酸为选自由丙氨酸、天冬氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、甲硫氨酸和天冬酰胺组成的组的氨基酸序列组成;
(b2)一种改良型腈水合酶,其特征在于,α亚基由序列号4所示的氨基酸序列组成,β亚基由序列号2所示的氨基酸序列的从N末端开始数第17位的脯氨酸变为甘氨酸、第57位的丝氨酸变为甲硫氨酸,第107位的酪氨酸变为赖氨酸、114位的赖氨酸变为酪氨酸、167位的天冬酰胺变为丝氨酸,第219位的缬氨酸变为丙氨酸,序列号4的从N末端开始数第83位的谷氨酰胺被选自由丙氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸和天冬酰胺组成的组的氨基酸置换的氨基酸序列组成;
(b3)一种改良型腈水合酶,其特征在于,其为由序列号38所示氨基酸序列及序列号37所示氨基酸序列组成,α亚基由序列号38所示氨基酸序列的从N末端开始数第83位的氨基酸被甲硫氨酸置换的氨基酸序列组成,β亚基由序列号37所示的氨基酸序列组成;
(c)一种改良型腈水合酶,其特征在于,其为由序列号4及序列号2的氨基酸组成的腈水合酶,α亚基由序列号4所示的氨基酸序列组成,β亚基由序列号4所示氨基酸序列的从N末端开始数第82位的氨基酸为选自由半胱氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、苏氨酸和酪氨酸组成的组的氨基酸序列组成;
(d)一种改良型腈水合酶,其特征在于,其为由序列号4及序列号2的氨基酸组成的腈水合酶,α亚基由序列号4所示的氨基酸序列组成,β亚基由序列号4所示氨基酸序列的从N末端开始数第85位的氨基酸为选自由半胱氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、酪氨酸所组成的组的氨基酸序列组成。
2.根据权利要求1所述的改良型腈水合酶,其中,所述腈水合酶来源于红球菌属(Rhodococcus)细菌或诺卡氏菌属(nocardia)细菌。
3.一种DNA,其编码权利要求1或2所述的改良型腈水合酶。
4.一种重组载体,其包含权利要求3所述的DNA。
5.一种转化体,其包含权利要求4所述的重组载体。
6.一种腈水合酶,是从培养权利要求5所述的转化体而得到的培养物中提取的。
7.一种腈水合酶的制造方法,其特征在于,培养权利要求5所述的转化体,由得到的培养物提取腈水合酶。
8.一种酰胺化合物的制造方法,其特征在于,使权利要求1或2所述的改良型腈水合酶或培养权利要求5所述的转化体而得到的培养物或者该培养物的处理物与腈化合物接触。
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