[发明专利]一种毛叶山桐子中抗菌成分的提取方法及用途

权利要求书

1.一种毛叶山桐子中抗菌成分的提取方法，包括以下步骤：

(1)从干燥的毛叶山桐子果实分离出果皮和种子，将种子粉碎后得干粉，以乙酸乙酯为溶剂微波浸提3-5次，微波功率为700W，每次10-20分钟，分离提取液，浓缩提取液得乙酸乙酯提取浸膏，分离所得的滤渣再用质量百分比浓度为70％的乙醇提取4次，每次10小时，合并提取液，浓缩至无醇味，得乙醇提取浸膏；取乙醇提取浸膏，经100-200目硅胶柱，干法上样，硅胶柱先后以二氯甲烷、乙酸乙酯和甲醇进行洗脱，从而将其分为3个部分，分别为二氯甲烷部分、乙酸乙酯部分和甲醇部分；

(2)将步骤(1)所得乙酸乙酯提取浸膏经固相柱层析，以环己烷-丙酮混合溶剂进行梯度洗脱，分别得到化合物β-香树脂醇和化合物β-谷甾醇；

(3)将上述步骤(1)中乙醇提取浸膏层析柱洗脱后得到的乙酸乙酯部分，过大孔吸附树脂柱，以石油醚-乙酸乙酯混合溶剂进行梯度洗脱，分别得到化合物二十碳酸和6-羟基-2-[[[(1-羟基-6-氧代-2-环己烯基)羰基]氧]甲基]苯基-β-D葡糖苷；

所述步骤(2)的具体操作如下：将步骤(1)所得乙酸乙酯提取浸膏经固相柱层析，以环己烷-丙酮混合溶剂进行梯度洗脱，梯度洗脱混合溶剂中环己烷、丙酮的体积比依次为30:1、25:1、20:1、15:1、10:1和5:1；收集两者体积比为30:1、25:1、20:1的洗脱流分，旋蒸除去溶剂，干燥，得到化合物β-香树脂醇；收集两者体积比为15:1、10:1和5:1的洗脱流分，旋蒸除去溶剂，干燥，得到化合物β-谷甾醇；

所述步骤(3)的具体操作如下：将上述步骤(1)中乙醇提取浸膏层析柱洗脱后得到的乙酸乙酯部分，过大孔吸附树脂柱，以石油醚-乙酸乙酯混合溶剂进行梯度洗脱，梯度洗脱混合溶剂中石油醚、乙酸乙酯的体积比依次为25:1、20:1、15:1、10:1和5:1，收集25:1和20:1的洗脱流分，旋蒸除去溶剂，干燥得到化合物二十碳酸；收集15:1、10:1和5:1的洗脱流分，旋蒸除去溶剂，干燥得到6-羟基-2-[[[(1-羟基-6-氧代-2-环己烯基)羰基]氧]甲基]苯基-β-D葡糖苷；

所述步骤(3)中的大孔吸附树脂为D101树脂。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(2)中的固相柱为中性氧化铝柱。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于：所述中性氧化铝的粒度为100-500目。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于：所述中性氧化铝的粒度为100-200目。