[发明专利]一种液相色谱固定相的制备方法及其糖基键合固定相

权利要求书

1.一种液相色谱固定相的制备方法，包括如下步骤：

a.硅胶预处理：硅胶加入质量浓度为1％～38％的盐酸或硝酸溶液中，加热至回流，搅拌1～48小时，过滤，水洗至中性，于80～160℃下干燥至恒重；

b.硅胶表面引入巯基：将步骤a所得干燥硅胶置于玻璃或者聚四氟乙烯反应容器中，在惰性气体氛围下加入有机溶剂搅拌，滴加硅烷偶联剂，保持温度为60～140℃条件下搅拌2～48小时；反应体系冷却至室温，减压过滤并依次用甲醇、水、四氢呋喃、甲醇洗涤，固体产品在60～90℃条件下干燥6-24小时即得巯丙基硅胶；

c.巯基-烯烃点击化学反应键合糖固定相：将步骤b所得的3-巯基丙基硅胶中加入体积比为1/10～10/1的水/甲醇或水/乙醇混合溶剂中，每克3-巯基丙基硅胶所需混合溶剂量为5-50mL，再加入烯基糖和引发剂，在40～70℃条件下反应10～100小时；过滤，依次用甲醇、水、甲醇洗涤，所得固体于60～90℃条件下干燥6～48小时，即得键合糖固定相。

2.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤b所用的有机溶剂为甲醇，乙醇，乙腈，甲苯，二甲苯、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺中的一种；每克硅胶所需有机溶剂的量为5-30mL。

3.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤b所用硅烷偶联剂有如下结构：

其中，X为-OCH₃或-OCH₂CH₃；

步骤b中硅烷偶联剂的使用量为每克硅胶使用0.1mL-2mL。

4.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤c所用烯基糖为修饰了烯丙基的单糖、二糖、聚合度为3～10的寡糖中的一种或二种以上。

5.按照权利要求1或4所述的制备方法，其特征在于：步骤c所用烯基糖使用量为每克3-巯基丙基硅胶使用1～50mmol。

6.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤c所用的引发剂为偶氮二异丁腈或偶氮二异庚腈。

7.按照权利要求1或6所述的制备方法，其特征在于：步骤c中引发剂使用量为每克3-巯基丙基硅胶使用0.01～1mmol。

8.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤a中每克硅胶所需盐酸或硝酸溶液的量为2-100mL。

9.一种权利要求1-8任一方法制备的糖基键合固定相，其特征在于：键合相为单糖或二糖或寡聚糖，而且键合相中含有特征的硫醚连接基团，其结构式如下：

其中Silica为硅胶，n＝1-10。