[发明专利]一种用聚乙二醇制备丝素微球的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种丝素微球的制备方法，具体的说，是一种用聚乙二醇制备丝素微球的方法。

背景技术

丝素蛋白是蚕丝中最重要的组成部分，约占重量的70％，由甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸等18种氨基酸组成，是一种天然蛋白质。丝素蛋白具有优良的理化性能，无毒、无刺激性、生物相容性好、可生物降解，在很大程度上满足生物材料的需求，同时丝素蛋白具有优异的加工性能，可以制备成膜、凝胶、微球、多孔支架等，为药物载体提供了广阔的材料应用范围。中国专利申请第201310203722.2号公开了一种可注射丝素蛋白原位凝胶的制备方法，该方法通过将丝素蛋白水溶液和聚乙二醇或丙二醇溶液混合后凝固形成凝胶，由于凝胶颗粒的粒径较小不适用于负载药物，因此有必要开发一种简单可行的方法来制备丝素微球以作为药物载体。

目前制备丝素微球的方法主要有乳剂-有机溶剂蒸发/抽提法、相分离法、自组装法、超临界流体快速膨胀法、脂质体模板制备法、微流控法和喷雾干燥法等。乳化法、自组装法、脂质模板法都需要添加有机溶剂，而有机溶剂的残留会直接限制丝素微球在临床上的应用。超临界流体快速膨胀法、微流控法和喷雾干燥法虽然比较简单，但装置和制备条件都比较复杂。相分离法的制备过程虽然相对简单并安全无毒，但操作流程比较繁琐。

有鉴于上述的缺陷，本设计人，积极加以研究创新，以期创设一种用聚乙二醇制备丝素微球的方法，使其更具有产业上的利用价值。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明的目的在于克服现有丝素微球制备过程中有机溶剂残留、工序复杂、耗时长、成本高、不利于产业化生产和临床应用的缺点，提供一种高效安全、快速简单、资源利用度好、生产成本低、生物相容性好的丝素微球的制备方法。

本发明提供的一种用聚乙二醇制备丝素微球的方法，其特征在于：包括以下步骤：

将质量百分比为1-30％的丝素蛋白溶液与质量百分比为10-60％的聚乙二醇溶液放置在4-60℃温度条件下30min，然后按一定比例将所述丝素蛋白溶液和聚乙二醇溶液混合均匀，孵育一定时间后离心洗涤，配制成丝素微球悬浮液。

进一步的，所述聚乙二醇的分子量范围为2000-20000。

进一步的，所述聚乙二醇的分子量的范围为4000-20000。

进一步的，所述聚乙二醇分子量为4000、6000的浓度范围是质量百分比为30-60％；分子量为10000的浓度范围是质量百分比为20-50％；分子量为20000的浓度范围是质量百分比为20-40％。

进一步的，所述丝素蛋白溶液的稀释范围是质量百分比为5-15％。

进一步的，所述丝素蛋白溶液和聚乙二醇溶液的放置温度范围为室温至60℃。

进一步的，所述丝素蛋白溶液与所述聚乙二醇溶液的体积比范围是5:1-1:10。

进一步的，所述丝素蛋白溶液与所述聚乙二醇溶液的体积比范围是2:1-1:5。

进一步的，所述孵育条件为：室温孵育1-24h。

进一步的，所述丝素蛋白溶液的制备步骤如下：将已脱胶的熟丝浸润在9.3M的LiBr溶液中并置于60℃烘箱中4h，溶解后得到丝素蛋白溶液；将该丝素蛋白溶液倒入透析袋中用去离子水透析3d；透析结束后将丝素蛋白溶液离心去除不溶物杂质，然后倒入透析袋中用分子量20000、15wt％的聚乙二醇溶液透析24h，获得浓缩丝素蛋白溶液。

借由上述方案，本发明至少具有以下优点：本发明选择药用助剂聚乙二醇与丝素蛋白溶液共混来制备丝素微球，制备过程不需要复杂的装置，操作流程简单易行、耗时短、成本低，而且不添加有机溶剂，所制备的丝素微球生物安全性高，可直接应用于临床。

上述说明仅是本发明技术方案的概述，为了能够更清楚了解本发明的技术手段，并可依照说明书的内容予以实施，以下以本发明的较佳实施例并配合附图详细说明如后。

附图说明

图1是分子量4000、浓度40wt％的PEG溶液与8wt％丝素蛋白溶液共混所制备的丝素微球的扫描电镜图；

图2是分子量4000、浓度60wt％的PEG溶液与8wt％丝素蛋白溶液共混所制备的丝素微球的扫描电镜图；

图3是分子量6000、浓度40wt％的PEG溶液与8wt％丝素蛋白溶液共混所制备的丝素微球的扫描电镜图；

图4是分子量6000、浓度60wt％的PEG溶液与8wt％丝素蛋白溶液共混所制备的丝素微球的扫描电镜图；

图5是分子量10000、浓度30wt％的PEG溶液与8wt％丝素蛋白溶液共混所制备的丝素微球的扫描电镜图；