[发明专利]一种量子点-抗体溶液及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术分析检测领域，尤其是一种量子点-抗体溶液及其制备方法与应用。

背景技术

现阶段，快速检测试剂盒一般的标记物是胶体金或者荧光基团。例如，检测转铁蛋白(SF)的检测试纸，由含有胶体金标记的抗人SF抗体的胶体金-抗体垫。

胶体金标记的检测试剂盒虽然成本较量子点更低，但检测灵敏度不如量子点标记高，检测范围也较量子点更窄。荧光基团标记的检测试剂盒，灵敏度也低于量子点标记。

胶体金使用可见光吸光进行检测，结果为反应区上一条红色或紫色的条带。一般胶体金检测试剂盒均为肉眼观察该条带是否出现及颜色深浅。而量子点则是由紫外光激发，产生非常强的激发光，其信号强度要大于胶体金的反应信号，提高灵敏度。同时，当胶体金在反应区结合达到一定值时，再增加结合胶体金不会改变条带颜色。而量子点是进行发光强度测定，故而无此问题，从而增大检测范围。

和荧光基团相比，量子点的激发光和发射光距离较远，故而激发光对于发射光的干扰很小，从而减小检测的本底值，进而提高灵敏度。同时，量子点的激发光谱很窄，故而在峰值的光强非常强。若使用同样光栅进行测定时，量子点产生的激发光强度远远大于荧光基团的发光强度。故而量子点标记得到的激发光信号更强。同时，和荧光基团相比，量子点具有相似或者更高的吸光系数和光量子产率。故而使用量子点标记，其检测灵敏度较荧光基团更高。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种量子点-抗体溶液。

本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述量子点-抗体溶液的制备方法。

本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述量子点-抗体溶液的应用。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种量子点-抗体溶液，是由下述方法得到的：

(1)每20-200nmol抗体和200pmol量子点混匀后，加入40-200nmol的EDC和NHS，避光反应60-180分钟并持续搅拌；

(2)所得反应混合物转移到10K-100KDa孔径的超滤管中，在速度10,000×g下离心15分钟，重复5次；

(3)收集超滤管中的反应产物，即为量子点-抗体交联物；

(4)在该溶液中加入2％BSA后，存于4℃冰箱中备用。

优选的，上述量子点-抗体溶液，所述抗体可以是所有单克隆或多克隆抗体。

优选的，上述量子点-抗体溶液，所述量子点是ZnS、CdS、HgS、ZnSe、CdSe、HgSe、CdTe、ZnTe、ZnO、PbSe、HgTe、CaAs、InP、InAs、InCaAs、CdS/ZnS、CdS/Ag2S、CdS/PbS、CdS/Cd(0H)₂、CdS/HgS、CdS/HgS/CdS、ZnS/CdS、ZnS/CdS/ZnS、ZnS/HgS/ZnS/CdS、CdSe/CdS、CdSe/ZnS、CdSe/ZnSe、CdSe/CuSe、CdSe/HgTe、CdSe/HgSe、CdSe/HgSe/CdSe、CdTe/HgS、CdTe/HgTe、InAs/InP、InAs/CdSe、InAs/ZnSe、MgS、MgSe、MgTe、CaS、CaSe、CaTe、SrS、SrSe、SeTe、BaS、BaSe、BaTe、CdS:Mn、ZnS:Mn、CdS:Cu、ZnS:Cu、CdS:Tb、ZnS:Tb中的任意一种或任意几种纳米粒子的组合，以及由上述任意一种量子点为核、二氧化硅为壳的核壳型纳米复合粒子。

上述量子点使用化学方法进行链接，即使用EDC和NHS，以连接-NH₂和-COOH基团。

上述量子点-抗体溶液的制备方法，具体步骤为：

(1)每20-200nmol抗体和200pmol量子点混匀后，加入40-200nmol的EDC和NHS，避光反应60-180分钟并持续搅拌；

(2)所得反应混合物转移到10K-100KDa孔径的超滤管中，在速度10,000×g下离心15分钟，重复5次；

(3)收集超滤管中的反应产物，即为量子点-抗体交联物；

(4)在该溶液中加入2％BSA后，存于4℃冰箱中备用。