[发明专利]一种秋刀鱼抗氧化肽及其分离提取方法与应用

权利要求书

1.一种秋刀鱼抗氧化肽，其特征在于所述抗氧化肽具有Ser-Gly-Ala-Ala-Met的氨基酸序列。

2.权利要求1所述的秋刀鱼抗氧化肽的分离提取方法，其特征在于包括以下操作步骤：

(1)将秋刀鱼去头及内脏，血水清洗干净后绞成鱼糜，将鱼糜与水按质量比为1：(2～4)混合，加入蛋白酶酶解4～12h，灭酶，冷却后离心取上清液，得到秋刀鱼蛋白酶解产物；

(2)用大孔吸附树脂对PSPHs进行分离，依次用蒸馏水及体积分数为10％～29％、30％～49％、50％～69％和70％～90％的乙醇溶液梯度洗脱，收集30％～49％乙醇溶液洗脱的组分，冷冻干燥，得到肽粉I；

(3)将肽粉I用葡聚糖凝胶色谱柱分离，以蒸馏水为流动相进行洗脱，按洗脱的时间先后依次得到三个组分，收集最后洗脱的组分，冷冻干燥，得到肽粉II；

(4)将肽粉II溶于水后，用反相高效液相色谱柱进一步纯化，依次用乙腈的体积百分比分别为2％～9％、10％～19％、20％～39％和40％～55％的乙腈-三氟乙酸水溶液为流动相进行洗脱，收集10％～19％的乙腈-三氟乙酸水溶液洗脱的组分，冷冻干燥，即得秋刀鱼抗氧化肽。

3.根据权利要求2所述的秋刀鱼抗氧化肽的分离提取方法，其特征在于：步骤(1)中所述的蛋白酶为风味蛋白酶或胰酶中的一种或两种；蛋白酶的添加量为500～1500U/g蛋白。

4.根据权利要求2所述的秋刀鱼抗氧化肽的分离提取方法，其特征在于：步骤(1)中所述酶解的pH为6.5～8.5，酶解温度为45～55℃。

5.根据权利要求2所述的秋刀鱼抗氧化肽的分离提取方法，其特征在于：步骤(1)中所述的灭酶是指在85～100℃下保温10～30min；所述的离心是指在1500～4000g的离心力下离心10～30min。

6.根据权利要求2所述的秋刀鱼抗氧化肽的分离提取方法，其特征在于：步骤(2)中所述的大孔吸附树脂是指HP-20树脂。

7.根据权利要求2所述的秋刀鱼抗氧化肽的分离提取方法，其特征在于：步骤(3)中所述的葡聚糖凝胶色谱柱是指Sephadex G-25葡聚糖凝胶色谱柱。

8.根据权利要求2所述的秋刀鱼抗氧化肽的分离提取方法，其特征在于：步骤(4)中所述的反相高效液相色谱柱是指C18柱；所述的三氟乙酸水溶液是指体积分数为0.1％～0.2％的三氟乙酸水溶液。

9.权利要求1所述的秋刀鱼抗氧化肽在食品、化妆品和医药领域中的应用。