[发明专利]一种荧光探针及其制备方法、牛奶中土霉素的检测方法

权利要求书

1.一种荧光探针，其特征在于，所述荧光探针由以单宁酸为碳源合成的表面酚羟基化的碳点与Fe³⁺溶液中的Fe³⁺结合组成。

2.权利要求1所述的荧光探针的制备方法，包括以下步骤：

(1)将单宁酸溶解在蒸馏水中，加热至180℃反应2h，冷却后，透析除杂，真空干燥，得到黑色粉末状碳点，溶于二次蒸馏水，获得碳点溶液；

(2)向pH为7的柠檬酸-NaHPO₄缓冲溶液中加入碳点溶液和Fe³⁺溶液，制备得到荧光探针。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中碳点在制备得到的荧光探针体系中浓度为0.5±0.02mg/mL。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所用Fe³⁺溶液中含有Fe³⁺的浓度为10^-4M。

5.根据权利要求2或3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)制备碳点溶液的具体步骤为：

称取0.1035g单宁酸，加40mL蒸馏水溶解，转移到聚四氟乙烯反应釜内衬中并装好钢套,于烘箱中逐渐加热到180℃并恒温2h,自然冷却至室温，用切割分子量为2000的透析袋于二次水中透析1天除去杂质，透析后的碳点溶液在12000r/min的转速下离心15min，除去聚集的大颗粒，收集滤液，最后于真空干燥箱中干燥48h,即得到黑色粉末状碳点,称重并溶于二次水中,即得质量浓度的碳点溶液。

6.根据权利要求2或4所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)制备荧光探针的具体步骤为:

在5mL干净的具塞试管中依次加入300μL pH为7的柠檬酸-NaHPO₄缓冲溶液，200μL上述合成的碳点溶液，10^-4M的Fe³⁺溶液350μL，定容至5ml,制备得到荧光探针，碳点在该体系中浓度为0.5±0.02mg/mL。

7.一种牛奶中土霉素的检测方法，包括以下步骤：

平行取荧光探针若干份，加入pH值为7.0的柠檬酸-NaHPO₄缓冲溶液，再加入不同浓度的盐酸土霉素标准溶液，分别检测加入盐酸土霉素标准溶液前后荧光探针的荧光强度，根据加入土霉素前后体系的发射峰处荧光强度的增加值与未加土霉素时体系的发射峰处荧光强度的比值和盐酸土霉素的浓度建立线性公式；在相同条件下检测加入牛奶前后探针的荧光强度，根据线性公式计算出牛奶中土霉素的具体含量。