[发明专利]一种功能植物乳杆菌及其复合菌粉的制备

权利要求书

1.植物乳杆菌植物亚种(Lactobacillus plantarum subsp.plantarum)Zhang-LL CGMCC No.6936。

2.纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)BNZ3CGMCC No.9146。

3.紫红曲霉(Monascus purpureus)Zhang-MP CGMCC No.9221。

4.一种功能植物乳杆菌及其复合菌粉的制备，其特征在于：(1)植物乳杆菌植物亚种菌粉的制备步骤：①菌种活化：将活化扩大培养后的植物乳杆菌植物亚种Zhang-LL菌种，接种到2L改良MRS培养基中，利用5L全自动发酵罐进行高密度发酵，温度控制在34℃，发酵液pH 6.5，搅拌转速为150r/min，发酵20～28h，得到发酵液；②收集菌泥：将发酵液置于离心机中，于4℃、8000r/min离心10min，收集得到菌泥；③预冻和冷冻干燥：将植物乳杆菌植物亚种Zhang-LL菌泥与1/10原发酵液体积的保护剂混合，冻干保护剂成分为15％脱脂乳粉，混合均匀后，得到浓缩发酵剂；将浓缩发酵剂于-35℃冰箱中预冻13h后，得到预冻活菌制剂，利用真空冷冻干燥机将预冻活菌制剂于-55℃、真空度0.08mBar的条件下，冻干48h至完全干燥状态，获得植物乳杆菌植物亚种冻干菌粉；(2)纳豆芽孢杆菌纳豆粉的制备步骤：①菌种活化与扩大培养：将纳豆芽孢杆菌斜面菌种接入装有20mL种子培养基的100mL三角瓶中，37℃、200r/min摇瓶振荡培养24～36h；再取1mL种子液移入装有50mL的发酵培养基的250mL三角瓶中，37℃、200r/min摇床培养24～36h，得到纳豆芽孢杆菌扩大种子液。②发酵：将食用大豆粉碎至100目，按适当比例加水，于0.1Mpa灭菌60min，冷却至40℃后，接种纳豆芽孢杆菌扩大种子液，搅拌均匀后，于37℃发酵24h，得到纳豆芽孢杆菌发酵物；③干燥：将纳豆芽孢杆菌发酵物于55～65℃干燥后，过60目筛子，得到纳豆芽孢杆菌纳豆粉；(3)紫红曲霉红曲粉的制备步骤：①菌种活化与扩大培养：将紫红曲霉斜面菌种接种到麦芽琼脂培养基上，于30℃培养48h，4℃保存；挑取活化好的菌种接种到固体孢子培养基中，于30℃培养5d后，用生理盐水洗下孢子，得到紫红曲霉孢子液；②固态发酵：将孢子液以10000r/min离心20min，取孢子泥，加入到固态发酵培养基中，搅拌均匀，于32℃培养12～15d，得到红曲米；③干燥与粉碎：将发酵完全的红曲米于50℃干燥后，进行粉碎，过60目筛子，得到紫红曲霉红曲粉；(4)植物乳杆菌植物亚种菌粉与纳豆芽孢杆菌纳豆粉、紫红曲霉红曲粉制备复合菌粉方法：将上述所制备好的植物乳杆菌植物亚种菌粉与纳豆芽孢杆菌纳豆粉、紫红曲霉红曲粉按1∶1∶1(w/w)比例进行充分混合，成为具有降血清胆固醇功效的复合菌粉。