[发明专利]一种猪伪狂犬病毒强毒株和疫苗毒株鉴别检测试纸

说明书

技术领域

本发明涉及一种家畜疫病感染与免疫的鉴别检测器具，特别是涉及一种猪伪狂犬病毒强毒和疫苗毒鉴别检测试纸。

背景技术

伪狂犬病（(Pseudorabies，PR）是由伪狂犬病毒（Pseudorabies Virus，PRV）引起的多种动物共患传染病，可感染牛、猪、犬、羊、狐狸和猫等。猪是伪狂犬病的传染源和自然贮存宿主，猪感染PRV后表现为发热，仔猪神经症状、高死亡率，大中猪呼吸道症状，母猪流产等临床特点。在2010年，伪狂犬病是我国规模化猪场进行疫病控制最为理想的疾病之一，许多猪场已经达到免疫无感染状态。然而在2011年，一些Bartha-K61疫苗免疫的猪场出现了变异的猪伪狂犬病病毒，表明传统的gE基因缺失疫苗不能提供足够的免疫保护。河南省猪群伪狂犬病的感染率自2005年以来呈现整体下降趋势，临床上以散发或非典型病例为主。但是，从2011年底开始，我省部分猪场突发伪狂犬疫情，很快在省内各地爆发，广泛流行；而且，部分猪场附近的羊、犬、猫、狐狸等动物也出现感染死亡状况。因此，现阶段我国猪伪狂犬病的防控变得更为棘手和复杂。

PRV属于疱疹病毒科（Herpesviridae），a-疱疹病毒亚科（Alphaherpesvirinae）的成员，基因组为线性双链DNA，大小约150 kb。整个PRV基因组至少含有70个基因，编码70-100余种蛋白。目前研究发现PRV可编码11个糖蛋白：gB、gC、gD、gE、gG、gH、gI、gK、gL、gM和gN。gB、gH、gL和gM疱疹病毒科中保守，而且gB、gH和gL对所有疱疹病毒在细胞培养物中进行复制都是必需的。gB蛋白能够诱导中和抗体的产生，与免疫保护相关。PRV gE蛋白最早被称为gI蛋白。1960年代筛选制备的PRV疫苗株如Bartha株及BUK株等均存在gE缺失。在二十世纪80年代中期，通过DNA重组技术构建了gE缺失的PRV突变株；在此基础上，将TK进行缺失使PRV病毒得到进一步致弱。许多gE缺失疫苗均能够预防攻毒感染或减轻攻毒感染造成的临床症状。虽然当前也存在gC和gG缺失的PRV疫苗，但在许多国家仅允许猪群使用gE缺失疫苗。从1990年代到2011年底，我国80%以上猪群均使用了gE基因缺失疫苗Bartha进行免疫接种。gE疫苗和gE抗体诊断配套使用用于PRV净化的前提是所有流行毒株均表达gE蛋白，而且流行株感染的动物均产生gE蛋白的抗体。目前几乎所用PRV野毒株均表达gE蛋白。通过gE基因缺失疫苗与gE抗体诊断方法的联合使用，一些欧洲国家如德国、奥地利、瑞典、丹麦和英国及美国已成功在家养猪群中净化了猪伪狂犬病。我国政府在2011年制订了《国家中长期动物疫病防治规划（2012-2020年）》，提出到2015年，原种猪场猪伪狂犬病达到净化标准；到2020年，全国所有种猪场猪伪狂犬病达到净化标准的目标。然而病原体的净化是一项长期而且艰巨的任务。如果要实现完全净化或接近净化状态可能需要100年时间甚至更长；例如美国的猪伪狂犬病首次出现在1909年，其净化计划始自1989年，到2005年绝大多数净化项目得以完成。即便如此，野猪群中PRV病毒的存在对家猪再次感染PRV造成了很大的威胁。因此，建立简便、快速、特异、敏感的鉴别诊断方法区分疫苗免疫动物及病毒感染动物十分必要。