[发明专利]一种基于磁珠与核酸水解分离发光标记物的核酸检测方法

权利要求书

1.一种基于磁珠与核酸水解分离发光标记物的核酸检测方法，其特征在于该方法包括以下步骤：

1)设计用于检测靶核酸片段的功能化探针；

2)将功能化探针修饰于功能化磁珠表面；

3)通过杂交，将靶核酸片段及其发光标记物捕获至磁珠表面；

4)磁分离，清洗，即得到已获取发光标记物的磁珠；

5)加入核酸水解试剂，通过核酸水解将发光标记物从磁珠表面分离下来，即得到不含磁珠的发光标记物溶液；

6)对该溶液进行发光检测，即可获取靶核酸信息。

2.根据权利要求1所述的一种基于磁珠与核酸水解分离发光标记物的核酸检测方法，其特征在于，步骤1)所述靶核酸片段为非扩增或经扩增后的核酸片段。

3.根据权利要求1所述的一种基于磁珠与核酸水解分离发光标记物的核酸检测方法，其特征在于，步骤1)所述功能化探针为：能够与功能化磁珠以共价键、非共价键或物理吸附方式结合，并与靶核酸片段序列互补的寡核苷酸。

4.根据权利要求1所述的一种基于磁珠与核酸水解分离发光标记物的核酸检测方法，其特征在于，步骤2)所述功能化磁珠为：适合连接功能化探针，包括但不限于在磁珠表面以共价键、非共价键或物理吸附方式结合功能化探针。

5.根据权利要求1所述的一种基于磁珠与核酸水解分离发光标记物的核酸检测方法，其特征在于，步骤3)所述发光标记物为适用于分子检测的能够产生发光信号的分子，包括荧光标记物。

6.根据权利要求1所述的一种基于磁珠与核酸水解分离发光标记物的核酸检测方法，其特征在于所述发光标记物为荧光素Cy3、Cy5，或发光标记物为碱性磷酸酶及其化学发光底物、辣根过氧化物酶及其化学发光底物。

7.根据权利要求1所述的一种基于磁珠与核酸水解分离发光标记物的核酸检测方法，其特征在于所述发光标记物，其标记靶核酸的方式包括通过靶核酸扩增进行标记，以及通过报告探针与靶核酸片段杂交进行标记。

8.根据权利要求1所述的一种基于磁珠与核酸水解分离发光标记物的核酸检测方法，其特征在于，其中步骤5)所述核酸水解试剂为能够水解核酸的化学或生物试剂，包括核酸水解酶如DNA酶、RNA酶、核酸内切酶或核酸外切酶。

9.根据权利要求1所述的一种基于磁珠与核酸水解分离发光标记物的核酸检测方法，其特征在于，步骤6)所述发光检测为：基于分子标记的发光检测体系，包括荧光、化学发光或其他波长的光。