[发明专利]一种筛选抗肿瘤药物的试剂盒及其使用方法

权利要求书

1.一种筛选抗肿瘤药物的试剂盒，其特征在于所述试剂盒包括以下试剂：

①试剂A：秀丽隐杆线虫；

②试剂B：大肠杆菌OP50。

2.根据权利要求1所述的一种筛选抗肿瘤药物的试剂盒，其特征在于：所述试剂B为含有大肠杆菌OP50活菌的冻干粉或菌液。

3.根据权利要求1所述的一种筛选抗肿瘤药物的试剂盒，其特征在于，所述秀丽隐杆线虫的浓度为80-100条/20μl，大肠杆菌OP50的浓度为10mg/ml。

4.根据权利要求1所述的一种筛选抗肿瘤药物的试剂盒，其特征在于，所述秀丽隐杆线虫为同步化线虫，秀丽隐杆线虫同步化的步骤如下：用M9缓冲液将平板上的秀丽隐杆线虫冲下来，将冲洗液吸入离心管；4000rpm/min离心3min，去除上清；加入终浓度为3.2％NaClO和1MNaOH的裂解液；在涡旋仪上震荡7min，使秀丽隐杆线虫的虫体破裂释放卵；4000rpm/min离心3min，去除上清，收集沉淀获得大量的秀丽隐杆线虫卵；M9缓冲液冲洗两次，加入1mlM9缓冲液，置于20℃培养箱中孵化48小时。

5.一种权利要求1所述的筛选抗肿瘤药物的试剂盒的使用方法，其特征在于，所述试剂盒的使用方法如下：

使用96孔细胞培养板，每孔中的终体积为200μl；每孔加入160μl的待测药液，加入20μl秀丽隐杆线虫液，再加入20μl大肠杆菌OP50菌液，每个处理设三个重复，放置到20℃生化培养箱中培养；培养至成虫后，在倒置显微镜下观察秀丽隐杆线虫野生型和突变体数目；野生型％＝100×野生型线虫数/线虫总数，与空白对照相比，野生型比率越高表示药物抗肿瘤的效果越好。