[发明专利]从大花红景天中同时制备克级高纯度酪醇、大花红天素及红景天苷的方法

说明书

技术领域

本发明涉及大花红景天中有效成分的制备方法。

背景技术

红景天为景天科植物大花红景天Rhodiola crenulata(Hook.f.et Thoms)H.Ohba的干燥根及根茎。能益气活血，通脉平喘，常用于气虚血瘀，胸痹心痛，中风偏瘫，倦怠气喘等症。其主要化学成分是黄酮类、苷及苷元、有机酸类等。其中，红景天苷(salidroside)及其苷元酪醇(tyrosol)具有广泛的药理作用，常用于神经保护作用、心血管保护作用，且另有文献报道具有抗炎、抗肿瘤和免疫调节作用。一定浓度的大花红天素(crenulatin)具有抗大鼠肺微血管内皮细胞凋亡的作用，且对脑微血管内皮细胞的凋亡具有双向调节的作用。

酪醇、大花红天素及红景天苷的化学结构式如下：

前期文献报道的多是酪醇、大花红天素、红景天苷其中一个化合物的制备方法，而且制备过程比较繁琐。王化田(高山红景天中的红景天甙、甙元酪醇、香豆素的生产工艺[D].哈尔滨：东北林业大学，2002.)采用CO₂超临界萃取、大孔树脂纯化，冷冻干燥获得含量达80％的红景天甙、酪醇。吴少雄等(大花红景天中大花红天素标准品的制备和鉴定研究[J].现代食品科技，2008，24(6)：596-597.)等结合大孔树脂富集、柱色谱梯度洗脱的方法，得到了含量较高的大花红天素。

发明内容

本发明提供一种从大花红景天中同时制备克级高纯度(质量分数超过98％)的红景天苷、酪醇及大花红天素的方法，该方法简便快捷，为三种化合物的大批量制备提供了一条新的思路方法。

根据本发明的方法，从大花红景天中同时制备克级高纯度的红景天苷、酪醇及大花红天素的方法，包括下述步骤：

1)将红景天药材用乙醇提取后乙醇沉淀，获得初提物；

2)将步骤1)获得的初提物用大孔吸附树脂纯化，洗脱并收集洗脱液，洗脱液浓缩后待进一步纯化；

3)用硅胶对步骤2)的浓缩液进行分离纯化，获得红景天苷、酪醇和大花红天素。

本发明所述的方法，其中步骤2)中所述大孔吸附树脂优选为D-101AB-8 HPD-100大孔树脂，最优选为D-101大孔树脂，洗脱液优选为10～20％乙醇。最优选的树脂与生药质量比为2:5，洗脱液体积与树脂的质量比为5:1，洗脱液为10％乙醇，洗脱体积流量为1～2倍体积/小时。

本发明所述的方法，其中步骤3)中将洗脱液浓缩为浸膏，以硅胶柱进行分离纯化，洗脱液为二氯甲烷-甲醇，硅胶与浸膏的优选质量比为4～5:1。以体积比50～70:1的二氯甲烷-甲醇洗脱硅胶柱，收集洗脱液，得酪醇；以体积比20～49:1的二氯甲烷-甲醇洗脱硅胶柱，收集洗脱液，得大花红天素；以体积比10～19:1的二氯甲烷-甲醇洗脱硅胶柱，收集洗脱液，得红景天苷。

更优选的，以体积比50:1的二氯甲烷-甲醇洗脱硅胶柱，收集洗脱液，得酪醇；以体积比20:1的二氯甲烷-甲醇洗脱硅胶柱，收集洗脱液，得大花红天 素；以体积比10:1的二氯甲烷-甲醇洗脱硅胶柱，收集洗脱液，得红景天苷。

本发明的方法以大花红景天为原料，通过乙醇提取、醇沉、过滤、大孔吸附树脂、硅胶柱等步骤得到了克级高纯度的酪醇、大花红天素以及红景天苷。该工艺最大优点是三种化合物不交叉，不需要薄层检测合并洗脱液流分，直接回收洗脱溶剂，即可获得单一成分；其次工艺基本采用等度洗脱，绝大部分回收溶剂经微调(调节比重)即可反复套用。该工艺简洁、操作简单、有机溶剂用量少、收率高，为酪醇、大花红天素及红景天苷的同时制备提供了一条切实可行的方法。

附图简述

图1为获得的三种化合物HPLC图谱，其中

图1-1为化合物1的HPLC图谱，化合物1的保留时间为16.6min，外标法测得其质量分数为98.15％；

图1-2为化合物2的HPLC图谱，化合物2保留时间为8.4min，峰面积归一法测得其质量分数为98.22％；

图1-3为化合物3的HPLC图谱，化合物3的保留时间为14.4min，外标法测得其质量分数为98.97％；

图2为获得的三种化合物HPLC图谱，其中

图2-1为化合物1的HPLC图谱，化合物1的保留时间为16.6min，外标法测得其质量分数为98.55％；

图2-2为化合物2的HPLC图谱，化合物2保留时间为8.4min，峰面积归一法测得其质量分数为98.64％；