[发明专利]一种信号放大免疫检测方法

权利要求书

1.一种利用过滤器进行信号放大免疫定量检测的方法，其特征在于：

所述过滤器由入口、过滤层和出口组成，所述过滤层内的过滤芯为偶联了待检物的特异 性结合物的固相材料；

所述方法为如下(A)-(D)中任一种：

(A)包括如下步骤：

1)将溶液A注入所述过滤器中，所述溶液A为含有待检物的待检样本溶液，所述待检 物被所述过滤芯特异性捕获，形成“过滤芯-待检物”复合物，记为复合物1；

2)将溶液B注入所述过滤器中，所述溶液B为经亲和素标记的检测物的溶液，所述经 亲和素标记的检测物为能够与所述待检物特异性结合的物质，所述经亲和素标记的检测物与 被所述过滤芯特异性捕获的所述待检物特异性结合，形成“过滤芯-待检物-经亲和素标记的 检测物”复合物，记为复合物2；

3)将溶液C注入所述过滤器中，所述溶液C为经生物素标记的指示剂的溶液，所述指 示剂为能够直接或间接产生颜色或光量变化的物质，所述经生物素标记的指示剂与所述复合 物2中的所述经亲和素标记的检测物相结合，形成“过滤芯-待检物-经亲和素标记的检测物- 经生物素标记的指示剂”复合物，记为复合物3；

4)检测，按照如下(a)-(c)中任一进行：

(a)直接采用检测器对捕获了所述待检物、所述检测物和所述指示剂的过滤芯进行检 测，通过所述指示剂产生的颜色或光量变化计算所述待检物的含量；

(b)用洗脱液对所述过滤器进行洗脱，收集含有所述指示剂的洗脱液，用检测器检测 所述洗脱液中所述指示剂的颜色或光量变化，进而计算所述待检物的含量；

(c)直接用检测器检测从所述过滤器流出的溶液C中所述指示剂的颜色或光量变化， 进而计算所述待检物的含量；

(B)包括如下步骤：

1)将溶液A注入所述过滤器中，所述溶液A为含有待检物的待检样本溶液，所述待检 物被所述过滤芯特异性捕获，形成“过滤芯-待检物”复合物，记为复合物1；

2)将溶液D注入所述过滤器中，所述溶液D为非标记检测物的溶液，所述非标记检测 物为能够与所述待检物特异性结合的物质，所述非标记检测物与被所述过滤芯特异性捕获的 所述待检物特异性结合，形成“过滤芯-待检物-非标记检测物”复合物，记为复合物4；

3)将溶液E注入所述过滤器中，所述溶液E为经亲和素标记的检测物的溶液，所述经亲 和素标记的检测物为能够与所述复合物4中的所述非标记检测物特异性结合的物质，所述经 亲和素标记的检测物与所述复合物4中的所述非标记检测物特异性结合，形成“过滤芯-待检 物-非标记检测物-经亲和素标记的检测物”复合物，记为复合物5；

4)将溶液C注入所述过滤器中，所述溶液C为经生物素标记的指示剂的溶液，所述指示 剂为能够直接或间接产生颜色或光量变化的物质，所述经生物素标记的指示剂与所述复合物 5中的所述经亲和素标记的检测物相结合，形成“过滤芯-待检物-非标记检测物-经亲和素标 记的检测物-经生物素标记的指示剂”复合物，记为复合物6；

5)检测，按照如下(a)-(c)中任一进行：

(a)直接采用检测器对捕获了所述待检物、所述检测物和所述指示剂的过滤芯进行检测， 通过所述指示剂产生的颜色或光量变化计算所述待检物的含量；

(b)用洗脱液对所述过滤器进行洗脱，收集含有所述指示剂的洗脱液，用检测器检测所 述洗脱液中所述指示剂的颜色或光量变化，进而计算所述待检物的含量；

(c)直接用检测器检测从所述过滤器流出的溶液C中所述指示剂的颜色或光量变化，进 而计算所述待检物的含量；

(C)包括如下步骤：

1)将溶液A注入所述过滤器中，所述溶液A为含有待检物的待检样本溶液，所述待检 物被所述过滤芯特异性捕获，形成“过滤芯-待检物”复合物，记为复合物1；

2)将溶液F注入所述过滤器中，所述溶液F为经生物素标记的检测物的溶液，所述经生 物素标记的检测物为能够与所述待检物特异性结合的物质，所述经生物素标记的检测物与被 所述过滤芯特异性捕获的所述待检物特异性结合，形成“过滤芯-待检物-经生物素标记的检 测物”复合物，记为复合物7；

3)将溶液G注入所述过滤器中，所述溶液G为亲和素的溶液，所述亲和素与所述复合 物7中的所述经生物素标记的检测物相结合，形成“过滤芯-待检物-经生物素标记的检测物- 亲和素”复合物，记为复合物8；

4)将溶液C注入所述过滤器中，所述溶液C为经生物素标记的指示剂的溶液，所述指示 剂为能够直接或间接产生颜色或光量变化的物质，所述经生物素标记的指示剂与所述复合物 8中的所述亲和素相结合，形成“过滤芯-待检物-经生物素标记的检测物-亲和素-经生物素标 记的指示剂”复合物，记为复合物9；

5)检测，按照如下(a)-(c)中任一进行：

(a)直接采用检测器对捕获了所述待检物、所述检测物和所述指示剂的过滤芯进行检测， 通过所述指示剂产生的颜色或光量变化计算所述待检物的含量；

(b)用洗脱液对所述过滤器进行洗脱，收集含有所述指示剂的洗脱液，用检测器检测所 述洗脱液中所述指示剂的颜色或光量变化，进而计算所述待检物的含量；

(c)直接用检测器检测从所述过滤器流出的溶液C中所述指示剂的颜色或光量变化，进 而计算所述待检物的含量；

(D)包括如下步骤：

1)将溶液A注入所述过滤器中，所述溶液A为含有待检物的待检样本溶液，所述待检 物被所述过滤芯特异性捕获，形成“过滤芯-待检物”复合物，记为复合物1；

2)将溶液D注入所述过滤器中，所述溶液D为非标记检测物的溶液，所述非标记检测 物为能够与所述待检物特异性结合的物质，所述非标记检测物与被所述过滤芯特异性捕获的 所述待检物特异性结合，形成“过滤芯-待检物-非标记检测物”复合物，记为复合物4；

3)将溶液H注入所述过滤器中，所述溶液H为经生物素标记的检测物的溶液，所述经 生物素标记的检测物为能够与所述复合物4中的所述非标记检测物特异性结合的物质，所述 经生物素标记的检测物与所述复合物4中的所述非标记检测物特异性结合，形成“过滤芯- 待检物-非标记检测物-经生物素标记的检测物”复合物，记为复合物10；

4)将溶液G注入所述过滤器中，所述溶液G为亲和素的溶液，所述亲和素与所述复合 物10中的所述经生物素标记的检测物相结合，形成“过滤芯-待检物-非标记检测物-经生物素 标记的检测物-亲和素”复合物，记为复合物11；

5)将溶液C注入所述过滤器中，所述溶液C为经生物素标记的指示剂的溶液，所述指示 剂为能够直接或间接产生颜色或光量变化的物质，所述经生物素标记的指示剂与所述复合物 11中的所述亲和素相结合，形成“过滤芯-待检物-非标记检测物-经生物素标记的检测物-亲和 素-经生物素标记的指示剂”复合物，记为复合物12；

6)检测，按照如下(a)-(c)中任一进行：

(a)直接采用检测器对捕获了所述待检物、所述检测物和所述指示剂的过滤芯进行检测， 通过所述指示剂产生的颜色或光量变化计算所述待检物的含量；

(b)用洗脱液对所述过滤器进行洗脱，收集含有所述指示剂的洗脱液，用检测器检测所 述洗脱液中所述指示剂的颜色或光量变化，进而计算所述待检物的含量；

(c)直接用检测器检测从所述过滤器流出的溶液C中所述指示剂的颜色或光量变化，进 而计算所述待检物的含量。