[发明专利]小分子抑制剂MLN4924在制备抑制博来霉素诱导的肺纤维化的药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种NEDD8活化酶的小分子抑制剂MLN4924在制备抑制博来霉素诱导的肺纤维化的药物中的应用、以及MLN4924在制备抑制炎症反应中NF-κB和MAPK信号通路激活的药物中的应用。

背景技术

肺纤维化是一种严重危害人类健康的疾病，通常是由于严重的外部创伤，感染，自发免疫反应，药物不良副反应等因素，引起肺的永久性损伤，导致肺泡外基质反复破坏，过度修复重建并沉积，最终导致正常肺组织结构改变、功能丧失。肺纤维化是一种以肺部永久性损伤为特征的、伴随着高死亡率的严重疾病，目前仍缺少有效的治疗方法。肺纤维化发病过程是一个复杂的病理过程，每个过程有多种细胞及细胞因子参与其中，目前其发病机理尚未完全阐释清楚，并且缺乏有效的治疗药物。

以往人们对于肺纤维化治疗和发病机制研究大多主要集中于纤维化形成过程中起主要作用的成肌纤维细胞的增殖，凋亡和活化等方面，近年来大量的临床与实验研究证实在肺纤维化的形成过程中支气管肺泡灌洗液(BALF)中的炎症细胞、细胞因子、蛋白和酶异常增多，它们与肺组织细胞之间的相互作用在肺纤维化形成过程中具有重要作用，提示我们抑制早期炎症反应可能也是预防纤维化形成的一种有效手段。

MLN4924是最近报道的一种选择性NEDD8活化酶(NAE)的小分子抑制剂，它是AMP类似物，主要通过与形成NAE-MLN4924复合物抑制NAE活性，从而抑制了部分依赖于Cullin-RingE3ligase(CRL)酶的蛋白质泛素化降解途径，由此导致了此类蛋白质的积聚，CRL的底物蛋白包括DNA复制剪切蛋白CDT1，ORC1，细胞周期抑制因子如p21，p27，Wee1。此前，关于MLN4924的研究报道多集中于其通过阻滞癌细胞周期或者引起细胞凋亡而发挥其抗肿瘤特性，而关于其在炎症反应中的作用知之甚少。

发明内容

本发明首次提出了小分子化合物MLN4924即NEDD8活化酶的小分子抑制剂MLN4924在有效抑制博来霉素诱导的肺纤维化中的应用。本发明为肺纤维化的治疗提供了一条新的途径和选择。

本发明提出了小分子抑制剂MLN4924在制备抑制博来霉素(Bleomycin)诱导的肺纤维化的药物中的应用。

MLN4924，其结构式如下所示，分子式为C₂₁H₂₅N₅O₄S，分子量为443.52，是NEDD8活化酶(NAE)的小分子抑制剂，主要通过与NAE形成NAE-MLN4924复合物抑制NAE活性，抑制了部分依赖于Cullin-RingE3ligase(CRL)介导的一类蛋白质的泛素化降解。MLN4924已被发现可作为一种潜在的新型抗癌药物(TeresaA.Soucy,etal.Nature.2009(458):732-736)。

本发明中，所述博来霉素诱导的肺纤维化包括博来霉素诱导的肺纤维化病变及肺纤维化早期急性肺损伤，具体包括但不限于因肺间质组织(如胶原蛋白等)过量积累而导致的肺组织纤维样病变、肺泡上皮细胞受损、羟脯氨酸含量升高、肺部炎症细胞浸润增多、肺部细胞因子和趋化因子过度表达等，从而导致肺部渐渐失去正常生理功能。目前研究人员已建立多种动物模型模拟肺纤维化的过程，包括药物诱导(如博来霉素)、颗粒物诱导(如石棉)、辐射诱导等。本发明中所用的博来霉素诱导肺纤维化的方法是一种可以有效模拟该疾病的方法。在具体实施方案中，在用博来霉素诱导肺纤维化的小鼠体内注射MLN4924后，小鼠肺纤维化的病理组织学评分、组织学病变、羟脯氨酸含量和胶原蛋白含量等都有明显减少或减轻。

本发明中，所述博来霉素诱导的肺纤维化包括小鼠或人或其他哺乳动物的博来霉素诱导的肺纤维化。

本发明中，所述药物可以通过抑制早期炎症过程来抑制博来霉素诱导的肺纤维化。所述“早期炎症过程”是包括肺泡上皮细胞受损、肺泡结构和功能异常、细胞因子及趋化因子的过度表达、炎症细胞向肺部的过度浸润等。在具体实施方案中，在以LPS诱导急性肺损伤的小鼠体内注射MLN4924后，小鼠的肺损伤指标，如肺的湿干比、组织学病变、肺部细胞因子的表达量及炎性细胞(如中性粒细胞、巨噬细胞)向肺部的迁移数量等都有明显减少或减轻。

本发明还公开了小分子抑制剂MLN4924在制备抑制博来霉素诱导的肺纤维化早期炎症过程的药物中的应用。