[发明专利]雨生红球藻细胞破壁方法在审
申请号: | 201410716791.8 | 申请日: | 2014-12-02 |
公开(公告)号: | CN104480013A | 公开(公告)日: | 2015-04-01 |
发明(设计)人: | 张勇;王天黎;王琦;吴秋瑾;梁文伟 | 申请(专利权)人: | 云南爱尔康生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N1/06 | 分类号: | C12N1/06;C12R1/89 |
代理公司: | 昆明正原专利商标代理有限公司 53100 | 代理人: | 金耀生 |
地址: | 675000 云南省楚*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 雨生红球藻 细胞 方法 | ||
1.一种细胞破壁方法,其特征在于包括如下步骤:
步骤(1),细胞在0℃以下进行冷冻和冰晶化,然后将其碎成粉末并分散于0℃以下的液体中;其中细胞固含量与液体的质量比为1:3~1:5;
步骤(2),向步骤(1)的液体中加入抗氧化剂,其中抗氧化剂的加入量为细胞固含量的0.1%~0.5%,得到料液;
步骤(3),将步骤(2)得到的料液经机械碾磨混合均匀后,用高压均质纳米机进行瞬间超高压破壁,即得到细胞破壁液料;所述的破壁过程在冷链低温和避光封闭的条件下进行。
2.根据权利要求1所述的细胞破壁方法,其特征在于所述的细胞为微藻细胞。
3.根据权利要求2所述的细胞破壁方法,其特征在于所述的微藻细胞为雨生红球藻细胞。
4.根据权利要求3所述的细胞破壁方法,其特征在于步骤(1)所述的冷冻和冰晶化温度为-4℃至-35℃。
5.根据权利要求3所述的细胞破壁方法,其特征在于步骤(1)所述的液体温度为-4℃至-50℃。
6.根据权利要求3所述的细胞破壁方法,其特征在于步骤(1)所述的液体为食用酒精的水溶液,食用酒精与水的质量比为10:90-60:40。
7.根据权利要求3所述的细胞破壁方法,其特征在于步骤(2)所述的抗氧化剂为维生素E、磷脂、丁基羟基茴香醚、没食子酸丙酯或特丁基对苯二酚,且均为食品级抗氧化剂。
8.根据权利要求3所述的细胞破壁方法,其特征在于步骤(3)所述的机械为胶体磨、砂轮磨或振荡磨。
9.根据权利要求3所述的细胞破壁方法,其特征在于步骤(3)所述的高压均质纳米机进行瞬间超高压破壁时,破壁压力为100mpa-180mpa;破壁次数为至少一次;所述的冷链低温的温度为20℃至-4℃。
10.根据权利要求9所述的细胞破壁方法,其特征在于所述的雨生红球藻细胞的破壁方法,包括如下步骤:
步骤(1),雨生红球藻细胞在-25℃至-45℃进行冷冻和冰晶化,然后将其碎成粉末并分散于-25℃至-45℃的质量浓度为30-45%的酒精水溶液中;其中雨生红球藻细胞固含量与液体的质量比为1:3.2~1:4;
步骤(2),向步骤(1)的液体中加入食品级抗氧化剂,其中食品级抗氧化剂的加入量为细胞固含量的0.2%~0.4%,得到料液;
步骤(3),将步骤(2)得到的料液经胶体磨碾磨混合均匀后,用高压均质纳米机进行瞬间超高压破壁,破壁压力为120mpa-130mpa,即得到细胞破壁液料;所述的破壁过程在冷链低温和避光封闭的条件下进行。
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