[发明专利]一种具有灭螺活性的菠萝泛菌及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及的是一种微生物领域，尤其涉及的是一种具有灭螺活性的菠萝泛菌及其应用。

背景技术

钉螺作为血吸虫唯一的中间宿主,其繁衍和分布与血吸虫病的流行传播密切相关，所以抑螺灭螺被认为是阻止血吸虫病传播的重要途径。目前主要的灭螺剂是化学药物类，这类药物容易对环境造成不可逆破坏。近年来植物内微生物群落结构得到广泛的关注和研究，国内外学者经过研究发现植物体内存在大量的微生物,这些微生物在动物的生长、发育、健康等方面都起到重要作用，因此，本发明将研究的方向对准了植物内的微生物群落，希望能找到一种选择性强、对环境影响较小的生物灭螺剂，以替代传统化学灭螺剂，保护环境。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种具有灭螺活性的菠萝泛菌及其应用，以提供一种选择性强、对环境影响较小的新的生物灭螺剂。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种具有灭螺活性的菠萝泛菌，Pantoea ananatis Z1，为泛菌属细菌，该细菌于2014年3月26日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC；地址：中国武汉，武汉大学；邮编：430072)，其生物保藏号为CCTCC NO：M2014105，分类命名为：Pantoea ananatis Z1。

所述细菌CCTCC NO：M2014105是从竹子叶片中筛选获得的，其生物学特征如下：

(1)形态学特征：该细菌革兰氏染色为阴性，在光学显微镜16×100油镜下观察该细菌呈直杆状，周生鞭毛。

(2)培养特征：在YEB固体培养基中生长良好，菌落圆润，呈淡黄色，边缘整齐，透明，易挑起，在YEB液体培养基中培养时随着培养时间延长，培养液由透明的浅黄色变为浑浊的黄色。

所述细菌CCTCC NO：M2014105的16S rRNA序列如SEQ ID NO.1所示，其中所述16S rRNA序列有487个碱基，将序列输入GenBank数据库中进行BLAST比对处理，结果发现，该16S rRNA序列与菠萝泛菌MDM-02(Pantoea ananatis，MDM-02)的16S rRNA序列(GenBank登录号：HE716901.1)同源性为99％，结合形态学特征和培养特征鉴定该细菌CCTCC NO：M2014105为泛菌属的菠萝泛菌(Pantoea ananatis)。

本发明还提供了上述细菌CCTCC NO：M2014105在制备生物灭螺剂中的应用，所述细菌 CCTCC NO：M2014105的发酵液作为生物灭螺剂杀灭钉螺。

本发明相比现有技术具有以下优点：本发明提供了一种具有灭螺活性的菠萝泛菌及其应用，该细菌CCTCC NO：M2014105能够作为生物灭螺剂快速有效地杀灭钉螺，可直接作为生物灭螺剂使用，用该细菌CCTCC NO：M2014105制备的生物灭螺剂与传统化学灭螺剂相比，制备方法简单，成本低，对环境友好。

具体实施方式

下面对本发明的实施例作详细说明，本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。

实施例1

本实施例的一种具有灭螺活性的菠萝泛菌CCTCC NO：M2014105菌株的筛选，包括以下步骤：

1、培养基的配制：

1)YEB液体培养基：牛肉浸膏为5.0g/L，酵母膏为1.0g/L，蛋白胨为5.0g/L，MgSO₄·7H₂O为4g/L，蔗糖为5.0g/L，pH7.0～7.5；

2)YEB固体培养基：将上述YEB液体培养基中加入15g/L的琼脂，获得YEB固体培养基。 

2、筛选步骤： 

1)在无菌条件下，取新鲜竹叶，用体积分数为75％的酒精浸泡1分钟，0.1％升汞浸泡12分钟，无菌生理盐水冲洗3遍后，将竹叶研磨，获得组织碎末；

2)将步骤1)的组织碎末接种到100mL的YEB液体培养基中，37℃培养12～16小时，培养的转速为180rpm，获得培养液；

3)按体积计，将步骤2)的培养液用无菌生理盐水依次稀释为10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5、10^-6和10^-7，获得稀释液；