[发明专利]一种血灵芝的培育方法

权利要求书

1.一种血灵芝的培育方法，包括如下步骤：

(1)斜面培养

①斜面培养基配方：按重量百分比计，由马铃薯12-20％、葡萄糖1.2-2.0％、琼脂1.2-2.0％和余量相思树木水浸液制备而成；

②斜面培养基制备：按比例称取洗净去皮后切成小块的马铃薯，按比例加入相思树木材水浸液，水煮、过滤，制得马铃薯汁；在马铃薯汁中按比例加入琼脂和葡萄糖，煮溶、过滤，制得斜面培养基溶液，将斜面培养基溶液分装到试管内，高温高压灭菌，制得试管斜面培养基；

③斜面菌种培养：将血灵芝的母种接种到试管斜面培养基上，菌丝长满斜面，选择无杂菌感染的斜面菌丝体，制得摇瓶菌种；

(2)摇瓶培养

①摇瓶培养基配方：按重量百分比计，由玉米粉0.8-1.2％、蔗糖1.6-2.4％、蛋白胨0.16-0.24％、酵母粉0.24-0.36％、磷酸二氢钾0.08-0.12％、硫酸镁0.05-0.07％和余量水制备而成；

②摇瓶培养基制备：按比例称取玉米粉加少量水搅拌均匀，水煮、过滤，制得玉米汁，按比例将蔗糖、蛋白胨、酵母粉、磷酸二氢钾、硫酸镁和余量的水加入到玉米汁中混合搅拌均匀，制得摇瓶培养基混合液；

③摇瓶菌种培养：摇瓶菌种采用二级培养，将摇瓶菌种接种到装有摇瓶培养基混合液的一级种子瓶内，置于摇瓶机上振荡培养；然后将一级种子瓶内长满菌丝的种子液倒入二级种子瓶内，置于摇瓶机上振荡培养，当菌丝长满枝丫，菌丝壁上见芽头锁状联合，菌丝球多，发酵液清香，并稍有粘稠，镜检无杂菌，制得发酵罐菌种；

(3)发酵罐培养

①发酵罐培养基配方：按重量百分比计，由玉米粉0.8-1.2％、蔗糖1.6-2.4％、酵母粉0.15-0.25％、磷酸二氢钾0.15-0.25％、植物油0.08-0.18％和余量水制备而成；

②发酵罐培养基制备：按比例称取玉米粉加少量水搅拌均匀，水煮、过滤，制得玉米汁，按比例将蔗糖、酵母粉、磷酸二氢钾、植物油和水加入到玉米汁中混合搅拌均匀，制得发酵罐培养基混合液；

③发酵罐菌种培养：发酵罐菌种采用二级培养，将发酵罐菌种接种到装有发酵罐培养基混合液的一级种子发酵罐内培养；然后将一级种子发酵罐内长满菌丝的种子液倒入二级种子发酵罐内培养，当种子液由稀变稠，菌丝体或菌丝球由少变多，菌丝有锁状联合，发酵液变成淡黄色，并由浑浊逐渐变清，无杂菌污染，制得菌棒菌种；

(4)菌棒培养

①菌棒培养基配方：按重量百分比计，由相思树木材颗粒10-16％、青冈树和/或桦树木材颗粒7-12％、五节芒草粉4-8％、玉米粉3-5％、小麦粉3-5％、黄豆粉1.5-2.5％、麦麸1.4-2.0％、蔗糖0.6-0.9％、石灰0.6-0.9％和余量水制备而成；

②菌棒培养基制备：按比例将相思树木材颗粒、青冈树和/或桦树木材颗粒、五节芒草粉、玉米粉、小麦粉、黄豆粉、麦麸、蔗糖、石灰和水混合搅拌均匀，装入筒状塑料袋内，高温灭菌，制得固体菌棒培养基；

③菌棒子实体培养：将菌棒菌种接种到固体菌棒培养基内，接种后的菌棒放入培养室内，在温度为24℃-28℃，湿度为50-85％的条件下培养，适时采收，获得血灵芝。

2.根据权利要求1所述的血灵芝的培育方法，其特征在于：所述的斜面菌种培养，培养温度为26℃-28℃，培养时间为6-8天。

3.根据权利要求1或2所述的血灵芝的培育方法，其特征在于：所述摇瓶菌种采用二级培养，一级种子瓶为400-600毫升三角瓶，装摇瓶培养基混合液80-120毫升，二级种子瓶为4000-6000毫升三角瓶，装摇瓶培养基混合液580-850毫升。

4.根据权利要求3所述的血灵芝的培育方法，其特征在于：所述摇瓶菌种采用二级培养，一级种子瓶和二级种子瓶都置于26℃-28℃的温度下振荡培养，培养时间都为4-7天。

5.根据权利要求4所述的血灵芝的培育方法，其特征在于：所述的发酵罐菌种采用二级培养，一级种子发酵罐为30-50升不锈钢罐，装发酵罐培养基混合液20-30升，二级种子发酵罐为400-600升不锈钢罐，装发酵罐培养基混合液240-360升。

6.根据权利要求5所述的血灵芝的培育方法，其特征在于：所述的发酵罐菌种采用二级培养，一级种子发酵罐和二级种子发酵罐的培养条件还包括搅拌、通气、压力控制、温度和时间，搅拌速度为220转/分钟，通气量为0.5-1(V/V·min)，罐压为0.04-0.05兆帕，温度为28℃-30℃，时间为40-48小时。